Rh血型鉴定 Rh血型系统中近50个抗原,但目前临床上一般只进行D抗原鉴定,当有特殊需要(如家系调查、亲子鉴定、配血不合等)可采用抗C、抗c、抗E、抗e等标准血清做全面的表型鉴定。RhD抗原鉴定采用的试剂主要有单克隆IgM抗D和IgG抗D血清试剂。用IgM抗D试剂可采用盐水介质法、微柱凝胶检测卡等方法鉴定。用IgG抗D血清可采用酶介质法、抗球蛋白试验及微柱凝胶抗球蛋白检测卡等方法鉴定。 Rh血型鉴定盐水介质法检测原理 单克隆IgM抗D试剂与红细胞上RhD抗原结合,在盐水介质中出现肉眼可见的凝集反应。 Rh血型鉴定盐水介质法操作步骤 ①标记:取小号试管3支,分别标记待测、阳性、阴性对照。 ②加抗体试剂:各管加入1滴IgM抗D试剂一滴。 ③加红细胞悬液:在标记各管中分别对应加入1滴待检红细胞悬液、5% RhD阳性和阴性红细胞悬液,混匀。 ④离心:1000 g离心15秒(或按照试剂说明书要求进行)。 ⑤观察及判断结果:阳性管凝集,阴性管不凝集,待测管凝集为阳性,不凝集为阴性。 Rh血型鉴定质量控制 1、方法: ①Rh血型系统的抗体多由后天免疫刺激(输血或妊娠)产生,不能通过反定型验证Rh血型。 ②可以采用玻片法鉴定,红细胞浓度一般为30%~50%,反应2分钟后观察结果。 2、对照:鉴定时必须有严格的对照试验,包括阴性对照、阳性对照。 3、阴性结果处理:待检红细胞与抗D试剂在盐水介质中不凝集,应进行Rh阴性确认试验,一般使用3种或3种以上IgG抗D试剂进行间接抗球蛋白试验。如3种IgG抗D试剂抗球蛋白试验的结果均为阴性,即可判定为Rh阴性,如果抗球蛋白试验有一种或一种以上的IgG抗D试剂的结果为阳性,即可判定为Rh阳性(弱D表型)。 4、其他同ABO血型鉴定。 |