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注意!出凝血实验中的那只“猫”

归去来兮 2024-11-28 06:02 PM 13人围观 医学


作者:王崇[1]  刘增宾[1]  王丽娴[2] 

单位:[1]河北医科大学第二医院鹿泉院区检验科 

[2]河北医科大学第一医院法律事务部



凝血酶生成潜力实验(Calibrated Automated Thrombogram,CAT)又叫“校准的自动凝血酶生成图”,英文简称是“CAT”,我们暂且称它是出凝血实验中的那只“猫”。因为CAT实验开展的医院不是很多,也没有标准收费,所以很多人不熟悉。


我在反复学习“血栓与止血百家争鸣大讲堂”第65期赖建禧老师的课件《凝血酶生成实验与传统凝血项目的机制差异》后,认为这是一个非常有临床意义的实验,感觉有必要做一下普及。



CAT实验原理:37℃条件下,在经特殊蛇毒处理过的乏纤维蛋白原血浆中加入少量组织因子TF(tissue factor)和钙离子,模拟体内正常的“外源点火、内源放大”的止凝血过程,TF刺激生成少量的凝血酶,正反馈激活凝血因子FV、FVIII、FXI,循环放大,使凝血酶大量生成,后者作用于特异的荧光底物使其发出荧光,荧光强度与凝血酶生成量成正相关,经描记凝血酶生成过程形成的曲线下面积,用于评估凝血酶生成潜力。见图1[1]




一、CAT实验指标临床意义



1、延迟时间:(lag time):指反应开始至凝血酶开始生成的时间,单位为分钟。

2、达峰时间(time to peak):指反应开始至凝血酶生成至峰值所用的时间,以分钟表示。

3、峰值(height):指最大凝血酶生成量,经标准品校准后,该参数以浓度表示(nM)。

4、凝 血 酶 生 成 潜 力(endogenous thrombin potential,ETP):即凝血酶生成曲线下面积,代表在促凝和抗凝双重因素作用下,被测血浆能够生成凝血酶的净量。



二、CAT实验几点特殊性



1、试剂中“少量”的TF:CAT实验尽量模拟体内生理性止凝血过程,试剂中加入的TF是少量的,就是要通过模拟体内“外源点火、内源放大”(见图2)的过程来检测凝血酶的生成过程。即:少量的TF激活外源性凝血途径后,生成少量的凝血酶,凝血酶反馈激活FV、FVIII因子,实现凝血酶生成的正反馈循环,进而生成大量的凝血酶。


(图2)

   

2、乏纤维蛋白原血浆:CAT实验原理为发色底物法,与其他以凝固法为实验原理的出凝血实验不同,CAT实验要求样本不能凝固,必须要预先用特殊蛇毒对血浆样本进行处理,使之成为乏纤维蛋白原血浆。


3、CAT实验又不完全与体内生理性止凝血过程相同



(1)CAT实验还是以血浆为样本的实验,并非全血实验,没有RBC及PLT的参与,与以“细胞学为基础的止凝血理论”不一致,尽管尽力去模拟,但仍有不同。

  

(2)CAT实验以发色底为法为实验原理,样本为乏纤维蛋白原血浆,没有天然的作用底物纤维蛋白原,实验过程中生成的凝血酶只能与抗凝血酶、特异荧光底物进行反应,没有PLT聚集提供的反应平台,会很快被抗凝血酶抑制,不能体现凝血酶的最大储备功能。众所周知,正常血浆样本中的凝血储备是远远高于抗凝能力的,否则离体的血标本就不会自然凝固!以凝固反应为实验原理的实验,仅消耗掉5%的凝血酶储备便可使血浆完全凝固[2]

   

4、CAT实验可根据实验目的不同,设计出不同的试剂组合,见(表1)

   

     

5、CAT与传统出凝血实验的异同

   


备注:1、血栓弹力图(Thrombelastograghy,TEG)2、凝血酶原时间(Prothrombin Time,PT)3、活化部分凝血酶时间(Activated partial thromboplastin time APTT)4、乏血小板血浆(platelet poor plasma,PPP)

   

参考文献

1、胡加萍,宗晓龙.凝血酶生成实验检测技术及临床应用进展[J].血栓与止血学,2023,29(6):288-292

2、武艺,鲁翌,叶絮等.凝血酶生成检测的应用现状与发展[J].血栓与止血学,2022,28(4):1123-1129

来源: 检验医学网
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