2024年美国CDC梅毒检测新指南：全面解读与关键更新

初始测试：使用非密螺旋体（Nontreponemal）血清学检测，如快速血浆反应素（RPR）或性病研究实验室（VDRL）测试。

确认测试：如果初始测试结果为阳性或反应性，随后进行密螺旋体（Treponemal）检测，如荧光密螺旋体抗体吸收（FTA-ABS）或密螺旋体颗粒凝集（TPPA）测试，以确认诊断。

目的：这种方法传统上是因为非密螺旋体测试成本较低，操作简便，而密螺旋体测试较为昂贵且操作复杂。

适用情况：适用于梅毒感染率较高的人群或临床环境。

初始测试：使用密螺旋体血清学测定，如酶免疫测定（EIA）或化学发光免疫测定（CIA）。

定量测试：如果密螺旋体测试结果为阳性，随后进行非密螺旋体检测，如RPR或VDRL，以定量分析。

确认测试：如果非密螺旋体测试结果为阴性，需要使用另一种类型的密螺旋体测试（如TPPA）进行确认。

目的：自动化的密螺旋体免疫测定适用于高通量筛查，可以快速处理大量标本。

适用情况：适用于梅毒感染率较低或需要快速筛查大量标本的人群。

成本：传统算法可能在梅毒低发地区更具成本效益，而反向算法可能在高发地区更为经济。

灵敏度和特异度：两种算法在灵敏度和特异度方面可能存在差异，特别是在低发地区，反向算法可能产生更多的假阳性结果。

实验室资源：选择哪种算法取决于实验室的资源，包括人员、设备、成本和标本量。

临床管理：两种算法都需要结合临床评估和其他实验室结果来指导患者的管理。

算法选择：根据实验室资源和患者人群选择最合适的算法。

结果报告：无论使用哪种算法，都应明确报告测试结果，并在必要时进行适当的后续测试。

主要通过检测血清或血浆中对某些非特异度脂质抗原（lipoidal antigens）反应的抗体来进行。这些抗体并不是针对梅毒螺旋体（T. pallidum）本身的特异度抗原，而是对一些在宿主和梅毒螺旋体中都存在的脂质抗原产生反应。

原理：非密螺旋体测试的原理是基于患者体内产生的抗体能够与测试中使用的脂质抗原（如心磷脂、胆固醇和磷脂酰胆碱）发生反应。这些抗原在梅毒螺旋体和宿主细胞中都能找到。

常用测试：

快速血浆反应素测试（RPR）：这是一种常用的非密螺旋体测试，通过检测血清中的抗体与这些脂质抗原的复合物形成沉淀来进行。

性病研究实验室测试（VDRL）：与RPR类似，VDRL也是一种检测血清中抗体的非密螺旋体测试，但读数方式不同，通常在显微镜下进行。

测试过程：测试通常从血清标本开始，标本与含有脂质抗原的试剂混合。抗体与抗原结合形成可观察的沉淀或凝集现象。通过显微镜或肉眼观察反应的强度，通常以稀释倍数（titer）来表示。

结果解读：非密螺旋体测试的结果通常以滴度（titer）报告，表示血清中抗体的相对浓度。滴度的下降通常在治疗后12个月内至少为四倍，这被认为是治疗有效的迹象。

局限性：非密螺旋体测试可能会产生生物学假阳性（BFP），即在没有梅毒的情况下测试结果也呈阳性，这可能与其他疾病或条件有关。在梅毒的早期阶段，非密螺旋体测试的灵敏度可能不如密螺旋体测试。

临床应用：非密螺旋体测试常用于梅毒的初步筛查和诊断。当非密螺旋体测试结果为阳性时，通常会使用密螺旋体测试进行确认。

治疗监测：非密螺旋体测试也用于监测治疗效果，通过比较治疗前后的滴度变化来评估。

特殊情况： 在某些情况下，如HIV感染者，非密螺旋体测试的灵敏度和特异度可能会受到影响。

报告方式：结果应以终点滴度报告，不应使用大于或小于的符号。

算法：非密螺旋体测试通常与密螺旋体测试结合使用，以提高诊断的准确性。可以采用传统算法（首先进行非密螺旋体测试）或反向算法（首先进行密螺旋体血清学测试）。

非密螺旋体血清学检测是梅毒诊断中的重要组成部分，但需要与其他测试和临床评估相结合，以确保准确的诊断和治疗。

密螺旋体血清学检测是针对梅毒的实验室诊断方法，专门检测针对梅毒螺旋体特异度抗原的抗体。

原理：这些测试通过检测血清中针对T. pallidum特异度抗原的抗体反应来进行。这些抗体通常在感染后产生，并在治疗后可能持续存在。

类型：

荧光密螺旋体抗体吸收测试（FTA-ABS）：这是一种基于荧光显微镜的测试，使用荧光标记的抗人免疫球蛋白来检测与固定在玻片上的整个T. pallidum结合的抗体。

密螺旋体血凝测试（TPHA）：这是一种间接血凝测试，使用T. pallidum抗原与明胶颗粒结合。

密螺旋体颗粒凝集测试（TPPA）：这是一种颗粒凝集测试，使用T. pallidum抗原与颗粒结合，检测血清中的抗体。

自动化免疫测定：随着技术的发展，许多自动化的密螺旋体免疫测定（如酶免疫测定EIA、化学发光免疫测定CIA）已经被FDA批准用于临床筛查。

测试过程：测试开始于血清标本的采集；标本与测试中特定的抗原混合；检测抗体与抗原结合产生的免疫复合物。

结果解读：结果通常以信号与截止值的比率（S/CO）或荧光比率的形式报告。根据测试的特定算法，对EIA或CIA的结果进行解释，通常包括阳性、阴性和不确定结果。

临床应用：密螺旋体测试通常用于确认非密螺旋体测试的结果，尤其是在非密螺旋体测试结果为阳性时。它们也用于评估早期原发性梅毒患者，此时非密螺旋体测试可能尚未反应。

局限性：密螺旋体测试的一个局限性是它们不能用于监测治疗效果，因为即使在治疗后，它们通常也会持续反应。

算法：在传统算法中，密螺旋体测试通常在非密螺旋体测试结果为阳性后使用。在反向算法中，密螺旋体测试作为初始测试，阳性结果需要通过非密螺旋体测试进行定量分析。

特殊情况：在HIV/AIDS患者中，密螺旋体测试的表现可能与一般人群有所不同，需要特别注意。

报告方式：结果应清晰报告，包括使用的测试类型、标本类型、测试结果和任何必要的解释。

密螺旋体血清学检测是梅毒诊断过程中的重要组成部分，它们提供了对T. pallidum感染的特异度证据。然而，它们需要与非密螺旋体测试、临床评估和其他实验室结果相结合，以确保准确的诊断。

指的是在患者就诊地点或附近进行的快速检测方法，通常不需要将标本送至中心实验室。POCT检测可以在短时间内提供结果，有助于快速诊断和及时治疗。

即时性：POCT检测能够在患者就诊时快速提供结果，减少了等待实验室结果的时间。

便捷性：这些测试通常设计为便携式，可以在多种环境下使用，包括诊所、社区卫生中心或甚至患者家中。

操作简便：POCT测试通常易于操作，不需要复杂的实验室设备或专业技术人员。

标本类型：POCT梅毒检测可以基于不同的标本类型，如全血、血清、血浆或唾液。

技术类型：包括基于免疫层析的快速测试、免疫荧光法、化学发光免疫测定等。

临床应用：POCT测试适用于梅毒的初步筛查和诊断，特别是在资源有限或偏远地区。

结果解读：POCT测试结果通常直观易懂，有的测试通过颜色变化来表示结果。

成本效益：快速测试的成本通常较低，适合大规模筛查和资源受限的环境。

局限性：尽管POCT测试提供了快速的结果，但它们可能不如中心实验室测试敏感或特异。

后续确认：对于POCT测试结果为阳性的情况，可能需要进一步的实验室确认试验。

POCT检测在提高梅毒诊断的可及性和效率方面发挥着重要作用，特别是在需要快速响应和治疗的情况下。然而，它们应作为综合诊断策略的一部分，需要结合临床评估和其他诊断工具使用。

是一种用于直接检测病原体遗传物质的实验室技术，它通过放大病原体的特定DNA序列来增强检测的灵敏度。对于梅毒的检测，NAATs主要针对T. pallidum的特定基因序列进行扩增和检测。

技术原理：NAATs通过特定的引物靶向T. pallidum的DNA序列，利用聚合酶链反应（PCR）或其他核酸扩增技术，如转录介导的扩增（TMA）等，来扩增这些序列。

灵敏度和特异度：NAATs通常具有较高的灵敏度和特异度，能够检测到低水平的T. pallidum DNA，有助于在早期感染或血清学测试结果不明确的情况下进行诊断。

检测方法：不同的NAATs方法可能使用不同的目标基因，如tp47（tp074）或polA（tp0105）等。某些NAATs技术，如实时PCR，可以定量检测T. pallidum的DNA。

临床应用：NAATs可以用于诊断一期梅毒，尤其是在病变渗出物中检测T. pallidum。它们也可以用于评估二期梅毒的皮肤病变，以及在血清学测试结果不明确时提供额外的诊断信息。

研究和开发：目前，美国没有FDA批准的用于梅毒的商业化NAATs试剂盒。然而，一些实验室开发了自己的NAATs方法，用于研究和临床诊断。

局限性：NAATs可能需要特定的实验室设备和训练有素的人员来执行。标本的采集、储存和运输需要严格遵守特定的条件，以避免DNA的降解或污染。

未来发展：随着技术的进步和对T. pallidum基因组的更深入了解，NAATs有望成为梅毒诊断的标准化工具。

报告和解释：NAATs的结果需要结合临床症状和其他实验室测试结果来综合解释。

NAATs在梅毒的诊断中提供了一种高度敏感和特异的方法，有助于提高诊断的准确性，尤其是在传统血清学测试结果不明确或需要快速诊断的情况下。随着研究的深入和新技术的发展，预计NAATs将在梅毒的诊断中发挥越来越重要的作用。

暗视野显微镜检查是一种用于直接观察梅毒螺旋体的实验室技术。这种检查方法特别适用于检测一期梅毒的病变渗出物，因为在这个时期，病变部位的螺旋体浓度较高，容易观察到。

原理：暗视野显微镜通过在低照明条件下观察标本，利用螺旋体的形态和运动性来检测T. pallidum。由于螺旋体的形态特征和运动方式，它们在暗场显微镜下显得非常醒目。

标本采集：需要采集病变部位的渗出物，通常是通过轻轻清洁和轻压溃疡基部来获取。对于生殖器、宫颈或直肠的病变，可以按照特定的程序收集血清性渗出物。

标本准备：将渗出物直接涂抹在显微镜载玻片上，或使用无菌的细菌学环收集渗出物并转移到载玻片上。需要避免标本中混入红细胞。

操作步骤：暗视野显微镜检查必须在标本收集后20分钟内完成，因为时间过长可能会导致螺旋体的运动性下降，影响观察结果。

局限性：暗视野显微镜检查需要专业的操作技能和经验，以区分T. pallidum和其他可能存在于口腔中的共生螺旋体。该方法不适用于口腔病变的检查，因为口腔中存在的共生螺旋体可能与T. pallidum混淆。

临床应用：暗视野显微镜检查可以作为性传播疾病诊所中的即时检测（POCT），有助于快速诊断一期梅毒，并及时开始治疗。

维护和培训：为了确保检查的准确性，需要定期进行暗场显微镜的熟练度测试，并且操作人员需要接受专业的培训。

监管和指南：暗视野显微镜检查的使用应遵循相关的临床指南和法规要求，确保检测结果的准确性和可靠性。

暗视野显微镜检查是一种快速、直接的梅毒诊断方法，尤其适用于资源有限或需要快速诊断的情况。然而，由于其对操作者技能的高要求和对标本采集时间的灵敏度，这种方法并不普遍适用于所有实验室环境。

组织切片的免疫组化染色是一种用于检测组织标本中特定抗原或蛋白质的实验室技术。在梅毒的诊断中，IHC可以用来检测福尔马林固定、石蜡包埋（FFPE）的组织切片中是否存在T.pallidum。

原理：IHC利用特定的抗体与组织标本中的抗原结合，然后通过标记的二抗（通常是酶或荧光标记）来可视化这些结合的抗体。

标本准备：组织标本首先需要经过福尔马林固定和石蜡包埋处理，以保持组织结构和抗原的完整性。

染色步骤：组织切片被放置在载玻片上，然后进行脱蜡、水化、热诱导表位暴露等步骤。使用针对T. pallidum的特异度抗体进行孵育，这些抗体可以识别螺旋体的特定蛋白质。

可视化：采用酶标记的二抗与一抗结合，通过酶底物反应产生可视化的颜色变化，通常使用显色剂如3,3'-二氨基联苯胺（DAB）来产生棕色沉淀。

临床应用：IHC常用于检测不典型或难以诊断的梅毒病变，尤其是在皮肤、大脑、胎盘或脐带等组织标本中。

局限性：IHC可能受到交叉反应的影响，特别是当使用的抗体与非梅毒螺旋体的其他螺旋体或组织成分有交叉反应时。

优势：与暗场显微镜检查相比，IHC提供了一种更为客观的结果评估方式，因为它依赖于颜色变化而不是对运动性的主观评估。

辅助诊断：IHC可以辅助诊断神经梅毒、眼梅毒和耳梅毒等并发症，这些情况下的梅毒螺旋体可能不易通过其他方法检测。

研究和开发：研究人员可能使用IHC来研究T. pallidum的组织分布和病理机制。

指南：实验室应遵循临床和病理学指南，确保IHC测试的准确性和一致性。

免疫组化染色是一种有力的工具，可以提供梅毒感染的直接证据，尤其是在其他诊断方法不确定或不适用的情况下。然而，它需要专业的实验室设备和技术人员来执行和解释结果。

是一种用于增强组织切片中微生物或其他结构可视化的组织学技术。在梅毒的检测中，特定的镀银染色方法，如Warthin-Starry染色或Steiner染色，可以用来检测福尔马林固定、石蜡包埋组织切片中的T. pallidum。

原理：镀银染色通过物理吸附银颗粒到微生物细胞壁或细胞膜，增强其在显微镜下的可见性。

标本准备：组织标本经过福尔马林固定、石蜡包埋，并切成薄片以制作组织切片。

染色过程：组织切片经过一系列的化学处理，包括蛋白酶消化、银离子溶液的孵育，以及还原剂的使用，使银离子还原并沉积在螺旋体表面。

可视化：经过染色的T. pallidum在显微镜下呈现为黑色或深褐色，与周围组织的对比度高，便于观察。

临床应用：镀银染色可以用于检测不典型或难以诊断的梅毒病变，尤其是在其他检测方法无法提供明确结果时。

局限性：镀银染色可能受到背景染色的干扰，使得T. pallidum的识别变得困难。该方法的灵敏度可能不如免疫组化染色或核酸扩增检测。

优势：镀银染色可以提供良好的对比度，有助于观察螺旋体的形态特征。

辅助诊断：镀银染色可以辅助诊断梅毒的各个阶段，包括一期、二期和潜伏期梅毒。

研究和开发：研究人员可能使用镀银染色来研究T. pallidum的组织病理学。

指南：实验室应遵循临床和病理学指南，确保染色技术的准确性和一致性。

尽管镀银染色是一种传统的检测方法，但由于其灵敏度和特异度的限制，它可能不被作为首选的梅毒检测方法。在某些情况下，当需要对组织标本进行详细形态学评估时，镀银染色可以作为一种补充技术。然而，免疫组化染色和核酸扩增检测（NAATs）由于其更高的灵敏度和特异度，更常被用于梅毒的诊断。

脑脊液（Cerebrospinal Fluid, CSF）抗体检测是诊断神经梅毒（Neurosyphilis）的重要方法。神经梅毒是梅毒螺旋体（T. pallidum）侵入中枢神经系统后引起的感染，可能导致严重的神经损伤和一系列临床症状。

目的：检测CSF中的抗体以诊断或排除神经梅毒。

测试类型：包括非密螺旋体（Nontreponemal）和密螺旋体（Treponemal）抗体测试。

非密螺旋体抗体测试：如CSF快速血浆反应素（CSF-RPR）或CSF的性病研究实验室（CSF-VDRL）测试，这些测试检测对脂质抗原反应的抗体。

密螺旋体抗体测试：如CSF荧光密螺旋体抗体吸收（CSF-FTA-ABS）测试，这些测试检测针对T. pallidum特异度抗原的抗体。

自动化测试：某些密螺旋体免疫测定（如酶免疫测定EIA、化学发光免疫测定CIA）也可以在CSF标本上进行。

临床应用：主要用于评估有神经梅毒症状或体征的患者，以及在血清学测试结果不明确时。

结果解读：CSF抗体测试结果需要结合临床症状和其他实验室结果综合解读。

局限性：CSF抗体测试可能受到标本污染、测试灵敏度和特异度的限制。

后续步骤：如果CSF抗体测试结果提示可能的神经梅毒，可能需要进一步的神经影像学检查和神经学评估。

指南：实验室应遵循临床和实验室标准协会（CLSI）或其他专业组织提供的指南进行CSF标本的采集、处理和测试。

研究进展：持续的研究致力于提高CSF抗体测试的性能，包括开发新的生物标志物和检测方法。

CSF抗体检测是神经梅毒诊断的关键组成部分，但需要与其他临床和实验室数据结合使用，以确保准确的诊断和适当的治疗。由于神经梅毒可能导致严重的长期并发症，及时的诊断和治疗至关重要。