原理:试剂中的心磷脂作为抗原与抗体发生反应,卵磷脂可加强心磷脂的抗原性,胆固醇可增强抗体的敏感性。这些成分溶于无水乙醇中,在加入水后,胆固醇析出形成载体,心磷脂和卵磷脂在水中形成胶体状包裹在其周围,形成胶体微粒。将此抗原微粒混悬于甲苯胺红溶液中,加人待测血清,血清中的抗体与之反应后,可出现肉眼可见的凝集块。 试剂:试剂组成:TRUST抗原混悬液(抗原为心磷脂的甲苯胺红溶液)、反应纸卡、专用滴管、阳性对照和阴性对照。 操作:按试剂盒所附的使用说明书或实验室制定的 SOP 进行操作,主要操作过程如下:设定和加载阴性对照、阳性对照、质控品和待测样本到反应圈内→加抗原试剂→混匀反应→观察结果。如需定量检测, 可将待测血清用生理盐水倍比系列稀释(1:2、1:4、1:8、1:16、1:32),然后按上述定性方法进行试验。 (1)分别吸取50微升梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺在纸卡的两个圆圈中。 (2)取待检血清或血浆50微升(不需灭活)置于纸卡的另一圆圈中。 (3)用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂1滴于上述血清中。 (4)按每分钟100转摇动8分钟,肉眼观察结果。 将待检血清用生理盐水作倍比稀释,然后按上述定性方法进行试验,以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。 1.阳性反应(+++~++++):可见中等或较大的红色凝集物。 2.弱阳性反应(+~++):可见较小的红色凝集物。 3.阴性反应(-):可见均匀的抗原颗粒而无凝集物。 (1)试验需在室温(20 ~25℃)中操作。 (2)待测血清须新鲜、无污染,否则可能出现假阳性或假阴性结果。 (3)在规定的时间内及时观察结果。 (4)本法仅为非特异性血清学筛查试验,阴性结果不能排除梅毒感染,阳性反应结果需进一步做梅毒螺旋体抗体试验确认。 |