|
全自动生化分析仪上的免疫类项目（如B2MG、APOA1、APOB，免疫球蛋白IgA、IgG、IgM，尿微量白蛋白等）采用透射免疫比浊法检测。在抗原抗体反应中，生成的抗原抗体复合物与抗原抗体的比例密切相关，实验原理为在恒定剂量的抗体溶液中加入不同浓度抗原时，吸光度随待测样品浓度的增加而增加，测定吸光度增大，进而实测抗原浓度与理论抗原浓度呈现正相关，结果准确[1]。
随着待测样品浓度的继续增加，吸光度值反而减少，得到类似钟形的曲线。抗原抗体反应这一独特的现象，可以用著名的“海德堡曲线”来表示[2]。当待测物浓度过高，出现抗原过量，处于“后带”上，得到的结果会与实际浓度有较大的误差，甚至高浓度病理标本测出的结果是正常的。因此，进行前带检查参数设定，使生化反应抗体溶液足量的状态处于前带状态，对鉴别待测样品具有后带效应的高浓度标本显得尤为重要。患者，男，33岁，以“2型糖尿病性酮症酸中毒”至我院内分泌门诊就诊。为评估患者肾脏受损情况，接诊医生同时开具了尿常规检测和尿微量白蛋白测定。生化尿微量白蛋白检测结果为580mg/L，前带检查报警（Z）。比对尿常规结果时，发现尿干化学蛋白4+，两者结果差异性比较大，考虑是由于后带现象引起的尿微量白蛋白偏低。进行尿液5倍稀释后，测量值为402mg/L（前带检查未报警），检测结果准确，折合实际浓度为2010mg/L，证实是由于抗原浓度过高引起的后带现象。
如果临床检测项目未设置前带检查，而又没有可比对项目的情况下，就会发出错误的检验结果，影响临床的诊断和治疗。由此可见，前带检查非常有必要执行。前带检查仅适用于终点法，勾选逻辑检查1和检查类型（类型1），根据测定的一系列的已知浓度的梯度抗原（部分浓度超说明书线性的最大值）吸光度值数据，先设定检查点1、2、3和极限点1、2的位置，进而设定判定值1、2、3的吸光度值，应用判定公式判定，当判定公式1和2都满足时，前带检查报警（Z）。试剂使用的是重庆中元的尿微量白蛋白试剂，方法学为透射免疫比浊法，试剂说明书的线性范围为5-600mg，测定尿微量白蛋白理论浓度为311、600、720、900、1200、1457（单位mg/L），检查点1、2、3选择10、11、27点（程序1）和10、12、27点（程序2）及12、18、27点（程序3）的不同，比较公式1（检查点2-检查点1）/（检查点3-检查点1）在线性范围的上线值前后几个梯度浓度的差。在AU5800全自动生化分析仪测定的数据如下：
程序1相对于另外两种程序设计，极差值较大且值呈阶梯上升，容易找出判定值1的节点，所以在逻辑检查1中的检查点1、2、3选择10、11、27点，极限点1、2选择1、27点，而不选择0、27点。因为标本的加入在0-1点间，这样就排除了由于尿液标本的颜色、浊度对前带检查判定公式2的干扰，判定值1、2、3赋予0.84、3.0、0.92，检查类型选用类型1。
对于理论值600mg/L，尿微量白蛋检测3.0＞0.8578＞0.84会触发判定公式1，0.9213-0.0119=0.9094＜0.92不会触发判定公式2，所以不会触发前带检查报警（Z）。理论值720mg/L，尿微量白蛋检测3.0＞0.8545＞0.84会触发判定公式1，0.9583-0.0187=0.9396＞0.92，触发判定公式2，所以720mg/L，尿微量白蛋白检测会触发前带检查报警（Z）。前带检查技术主要是通过监测反应前后吸光度变化方向及大小，准确地识别反应过程中“底物耗尽”或“带现象”等异常反应，并通过报警提示检验人员作进一步处理，从而避免出现假性正常值、低值甚至负值等错误结果，进而影响临床诊断与治疗。对于同一项目的不同仪器、不同试剂、不同批次，前带检查参数设定会有所不同，是一个费时、费力、费试剂、费脑的过程，需要经验丰富的检验人员来执行，必要时需要厂商技术人员的协助。前带检查要经得起验证，报警率过高会影响检测效率，过低则会造成结果的误报，此技术是生化复检的一种重要规则，对保障生化检验结果的准确性十分重要。[1] 彭凤. 免疫透射比浊测定技术的进展和分析特性[J]. 检验医学,2012,27(4):252-256.[2] 肖子衿,李永杰,王伶.OLYMPUS生化分析仪检测尿mALB时后带现象预警参数设置的研究[J].实验与检验医学,2018,36(6):836-839，865
|
