CA199的检测方法和临床意义

1.1  ELISA法

1.1.1原理

采用ELISA双抗体夹心法。该法用抗CA19-9抗体包被微孔板，分别将标准品、阴性、阳性对照和待测标本加至包被孔中，反应后加入酶结合物，使特异性地形成固相抗CA19-9抗体CA19-9-酶标抗CA19-9抗体复合物，洗去未结合在固相上的反应物，再加入酶显色底物呈色。呈色程度与测定范围内的标本中CA19-9浓度成正比。

1.1.2 参考区间

1.2 CLIA法

1.2.1 原理

采用直接化学发光技术的双抗体夹心法对人血清或血浆中CA19-9进行定量检测。将标本、 冲洗缓冲液和包被了1116- NS- 19-9的顺磁性微粒子 混合;标本中的CA19-9与116-NS- 19-9包被的微 粒子结合;冲洗后加人吖啶酯标记的1116-NS- 19-9结合物；冲洗后将预激发液和激发液添加到反应混合物中。测量的化学发光反应强度，以相对发光单位(RLUs)表示。标本中CA19-9含量与系统检测出的RLUs成正比。

1.2.2 参考区间

正常人血清CA19-9 <37U/ml

1.2.3  注意事项

1.3 ECLIA法

1.3.1原理

采用双抗体夹心法原理。将待测标本、生物素化的CA19-9单克隆抗体和钉复合物标记的 CA19-9单克隆抗体一起温育，形成抗原-抗体夹心复合物：加人包被链霉亲和素的磁珠微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上；反应混合液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质通过清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过检测发光强度以及校准曲线确定待测标本的结果。

1.3.2 参考区间]

正常人血清CA19-9≤27U/ml。

1.3.3  注意事项

检测结果不受黄疸(胆红素< 112umol/L或 < 66mg/dl)、溶血(血红蛋白< 1. 4mmoV/L或 <2.2g/dI)、脂血( 脂肪乳剂< 1500mg/dl)和生物素<100ng/ml的影响。对于接受高剂量生物素 ( >5mg/d) 治疗的患者，必须在末次生物素治疗8小时后才能采血。检测结果不受类风湿因子影响 ( RF < 1500IU/ml)。

2.1. CA19-9是细胞膜上的糖脂质，在血清中以唾液黏蛋白形式存在，主要分布于胎儿胰腺、胆囊、肝脏及肠等部位和正常成年人胰腺、胆管上皮等处。其在正常人血清中含量较低。

2.2. CA19-9 是一种胃肠道肿瘤相关抗原，在胰腺癌和胆管癌中阳性率最高。CA19-9 的检测值可以帮助鉴别诊断胰腺癌，敏感性达到70% ~87%，但其检测值高低与肿瘤的大小无相互关系，不能作为胰腺癌的早期检查指标。其检测值升高主要见于胰腺癌、胆管癌、结肠癌和胃癌等恶性消化道肿瘤，诊断胆管 癌CA19-9的敏感性约为50% ~75%。卵巢上皮性肿瘤，50%表达CA19-9。卵巢黏液性囊腺瘤，CA19-9阳性率可达76%，浆液性肿瘤为27%。子宫内膜癌 及宫颈管腺癌也有一定阳性表达。

2.3. 良性疾病如慢性胰腺炎、胆石症、肝炎及肝 硬化等也有一定程度增高，但往往为一过性增高， 且其浓度多低于120U/ml，必须加以鉴别。

【人附睾蛋白4的检测及其临床意义】

1. 1. CLIA法

 1. 2. ELISA法

原理：采用双抗体夹心模式。采用链霉亲和素包被固相，标本中待测抗原与生物素化抗HE4单抗 结合后，通过生物素——链霉亲和素的作用吸附到固相上；洗涤后加入辣根过氧化物酶( HRP)标记的抗HE4单抗（二抗），使特异地形成固相抗体-HE4-酶标抗体免疫复合物，洗涤后加入酶显色底物呈色。呈色强度与标本中HE4浓度成正比。

正常人血清中HE4含量分布存在年龄、性别和种族等差异，国内外文献报道的参考区间也不相同。各实验室最好根据本室使用的检测系统,通过调查本地区一定数量的不同年龄、性别的正常人群，建立自己的参考区间。如用文献或说明书提供的参考区间，使用前应加以验证。

3.1. 对于接受高生物素治疗的患者，必须在末次生物素治疗8小时后，采集标本。

3.2. 待测标本和质控物禁用叠氮化物防腐，切勿使用加热灭活的标本；含有沉淀物的待测标本检测前需要充分离心。

3.3. 患者血清HE4检测值与检测方法有关，检验报告单中应注明HE4检测方法。

3.4 推荐用血清标本检测，标本在检测之前可放置2~8℃贮存3天，否则应置-20℃下存放并避免反复冻融。尚未证实血浆和其他体液对 HE4 ELISA试剂盒有效。

主要用于辅助临床卵巢癌的早期诊断、鉴别诊断、治疗监测和预后评估，与血清癌抗原CA125联合检测，可进一步提高肿瘤诊断的敏感性和特异性。在子宫内膜癌和呼吸系统肿瘤中也表现出较好的辅助诊断和病程监测价值。

不过，由于目前国内外对HE4参考区间尚无明确界定，且其含量分布存在种族差异， 如有文献报道欧洲人群临界值为< 150 pmol/L，进口试剂盒说明书建议的正常人血清HE4参考区间为0 ~150pmol/L，而国内试剂厂商建议的血清HE4参考区间为0~ 75pmo/L。因此，该指标用于临床肿瘤患者的辅助诊断尚有待完善。

4.1. 帮助评估绝经前和绝经后盆腔肿瘤妇女患上皮细胞型卵巢癌的风险，该检测结果必须与卵巢癌临床管理指南所规定的其他方法结合使用，综合评判，因为术前确诊可改善卵巢癌的预后。不过尚未证明其对下列人群有效:曾经进行治疗的恶性肿瘤患者、正在进行化疗的患者和年龄低于18岁的患者。

4. 2. 辅助上皮细胞型卵巢癌的早期诊断：HE4诊断敏感度约为72. 9%、特异性约为95%；尤其是在疾病初期无症状表现的阶段，敏感性优于CA125。

4.3.监控侵袭性上皮细胞型卵巢癌患者的治疗疗效以及疾病的复发和转移;应定期检测以观察HE4水平的动态变化，结果的判断必须结合临床和其他检查。不推荐HE4用于监控患有已知黏蛋白型或生殖细胞型卵巢癌患者。