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惊鸿一瞥,竟发现隐藏在血平板中的“卫星”,啥情况?

归去来兮 2023-7-19 03:38 PM 623人围观 医学


作者:史剑飞

单位:西安市儿童医院检验科 

   


流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)是一种革兰阴性短小球杆菌,作为儿童临床中常见的条件致病菌之一,是引起儿童社区获得性肺炎仅次于肺炎链球菌的致病菌,此外还可引起急性中耳炎、鼻窦炎、青春期前儿童细菌性阴道炎,Hi甚至入血引起菌血症及脑膜炎等。



最近临床中Hi感染明显增多,我们从血液、痰液、肺泡灌洗液及阴道分泌物等各类临床标本中均有分离到Hi。作为一种苛养菌,其生长需要V和X因子,在巧克力平板生长好,稍不留神容易漏检,检验人的慧眼识真发挥至关重要的作用! 


案例经过


病史

患儿,男,7月11天,发热咳嗽3天,以“急性支气管炎”入院,入院前曾静滴红霉素和阿莫西林治疗,体温波动在36.5~38.5℃,间隔12~16 h,咳嗽无缓解。自发病以来,患儿精神食纳可,查体均大致正常,神经系统未见阳性体征。


辅助检查

WBC 12.66×109/L,NEU 8.93×109/L,NEU% 70.5%,中性粒细胞可见中毒颗粒,空泡变性,HGB 118 g/L,SAA 29.18 mg/L,hs-CRP 15.60 mg/L,PCT 9.74 ng/L,ESR 61 mm/h,提示感染严重,治疗前送双份血培养,激素治疗2天后发热未缓解,患儿精神一般,颈抵抗阳性,双侧巴氏征和克氏征阴性。怀疑中枢神经系统感染,进行腰穿送脑脊液检测。


慧眼识真阳性发现


该患儿双份血培养在20 h后均报阳,接种血平板+镜检涂片:一份为革兰氏阳性球菌,一份为革兰氏阳性球菌(大量)+革兰氏阴性杆菌(少许),报危急值。第二天血平板形态,如下图。



若不仔细看菌落,很容易将小水滴状菌落遗漏,怀疑“卫星现象”,质谱鉴定为表皮葡萄球菌+Hi,立即转种血/嗜血平板(加万古等抗生素抑制阳球菌生长)同时发送二级报告并与临床沟通。



该患儿为血流感染(表皮葡萄球菌+Hi),脑脊液涂片镜下我们反复查看200个视野中发现1~2个疑似革兰阴性短杆菌(革兰确认+抗酸复核),脑脊液接种平板后同时将剩余脑脊液打入血瓶增菌培养。不过很遗憾脑脊液培养5天未培养出细菌,参考后续脑脊液高通量检测结果:Hi,置信度高。



   

讨论延伸


1、虽然我们检验人大海捞针慧眼识真找出隐匿在血平板中的Hi,但给我们敲响警钟:血培养报阳后,镜检涂片发现革兰阴性短小杆菌的同时,接种巧克力平板(必要时加万古等抗生素)是非常有必要。(下图为后续遇到类似的报阳处理流程)


①仅接种血平板后第二天的菌落(无论有无致病葡萄球菌),均有可能漏检Hi,若生长不良或无菌生长再接种巧克力无疑增加Hi的检出时间;


②若接种巧克力(不加抗生素),金葡等优势菌很可能抑制、覆盖或挤压Hi的生长,导致Hi生长不良或抑制易漏检!


   

2、上述病例送检的脑脊液未能培养出Hi,而高通量更敏感但成本高需考虑。分析原因:可能因标本接种量偏少、送检时间偏长及脑脊液的Hi浓度少或死亡导致,在与临床沟通后,对疑似化脓性脑膜炎患儿的脑脊液在标本量允许的情况下,可第一时间接种血培养瓶增菌,加大接种量等方法进一步提高检出率。


3、Hi的“卫星现象”,是在金黄色葡萄球菌的周围生长好,因葡萄球菌提供V因子,红细胞释放X因子促进Hi生长。以上病例发现Hi在致病性表皮葡萄球菌周围也可生长,我们在临床肺泡灌洗液标本的血平板中也发现类似“卫星”现象,在青春期女童阴道分泌物标本中发现溶血葡萄球菌周围的Hi生长。


“卫星”现象肺泡灌洗液(第2天)白色大菌落:表葡周围针尖菌落:Hi



总结


流感嗜血杆菌作为儿童临床常见感染的致病菌,其检出需要充分的临床知识、丰富的临床经验、合适的处理方式以及检验人甄别真假的能力。这需要我们检验人在日常的临床工作中要静下心来,从细微之处发现问题并总结思考,在ISO15189体系指导下不断改进并应用于临床,在领域内深耕扎根,提升技能,夯实自身,更好地服务于临床和患者。

编辑:小冉 审校:yeah

来源: 检验医学网
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