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被特殊标本折腾两小时,是种什么样的体验?

归去来兮 2023-7-13 03:25 PM 399人围观 医学


作者 | 徐奕胜

单位 | 赣南医学院第二附属医院 










前   言







在工作中遇到乳糜血样标本往往是检验人比较头疼的一件事,尤其是仅有一人当班时更是苦不堪言,究其原因不外乎于:乳糜血可引起血常规中的血红蛋白假性升高,导致光学法的凝血项目无法测出,影响生化中大部分项目不出结果,而这些结果有时又不得不抓紧时间报告,因为患者多数有急性腹痛症状,临床需马上知晓患者病情进展情况,回想起年初某晚班,自己就曾被乳糜标本折腾了两小时。








案例经过







1月26日门诊一患者采血时腹痛难忍的场景至今记忆犹新,当时心想莫不是结石痛吧,待血分析结果出来后,HGB 207g/L,已达危急值水平,如图1,WBC 21.32×109/L,RBC 5.72×1012/L,MCHC 449 g/L,PLT 495×109/L。


图1


根据工作经验,MCHC升高结合HGB升高,怀疑是乳糜血标本,查看红细胞直方图未见后端小隆起,如图2,可排除冷凝集因素干扰,因为当时仍是1月份天气较冷,MCHC的升高需首先考虑或排除冷凝集的影响。红细胞报警信息:Turbidity/HGBInterf?(乳糜血导致的对血红蛋白的影响),初步判断标本是乳糜血。


图2


将血常规及已促凝的生化管离心,可见白色浓稠奶油状的血浆/清层,如图3,根据之前《两个公式对比,解决乳糜血HGB问题!》,采用华西医院老师创立的公式[1],HGB校正值=HGB校正前-HGB血浆层×(1-HCT校正前),将患者血常规标本3000转离心5分钟,吸取奶油色血浆层单独检测CBC计数,发现奶油色的血浆层HGB高达91g/L,套用公式得出HGB校正值为158 g/L,接着与HGB相关的参数也需要校正,MCH校正值=HGB校正值/RBC校正前=27.6 pg,MCHC校正值=HGB校正值/HGT校正前=342.7 g/L。


图3


CT提示脂肪肝及胰头边缘毛糙,门诊拟“急性胰腺炎”收入院,此刻自己还在处理该患者门诊生化电解质结果时,住院部已送来其余的加做项目,如凝血五项、血型、肝肾功能、血脂等项目,简直有点“热锅上的蚂蚁——团团转”感觉,但冷静下来仔细思考处理的方法。


第一步,将血凝标本离心,吸取乳糜血浆层装入子弹头,使用PCR室小型高速离心机12000转离心10分钟,由于吸取底层血浆时操作有点小失误,不慎混有乳糜血浆层,于是进行了二次高速离心,吸取底部清亮的血浆置于小日立杯上机检测,如图4,其凝血结果如图5,除Fbg 5.32 g/L稍高外,余均正常。


图4


图5


第二步,血型检测的问题,之前认为乳糜血标本血浆中含有大量脂质颗粒,会挤占血型抗体的“空间”,导致反定型无法测出结果,故而一般采用盐水试管法进行血型鉴定,然而这次仅使用卡式法也能做到正反定型符合,如图6,考虑可能与患者是O型有关,若是A型或B型,反定型还能与正定型一致吗?


图6


第三步,将离心后的生化标本血清吸出,其中一部分直接上机检测,另一部分乳糜血清分装子弹头后在小型高速离心机里12000转离心10分钟,如图7,取底层清亮血清用于电解质仪测试。


图7


鉴于高度乳糜的血清可干扰生化诸多项目,故直接上机检测却不结果的生化项目,自己采用蒸馏水稀释血清2~5倍解决,最终该患者生化报告如图8,TP 168.9 g/L,TG 36.96 mmol/L,T-CHO 11.70 mmol/L。


图8








案例分析







急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是多种病因导致胰腺组织自身消化所致的胰腺水肿、出血及坏死等炎症性损伤。临床以急性上腹痛及血淀粉酶(AMY)或脂肪酶(LPS)升高为特点。AP发病后2小时血清AMY开始升高,12到24小时达到高峰,2到5天下降至正常。


查阅患者电子病历可知患者缘于1天前无明显诱因开始出现持续性中上腹疼痛,伴恶心、呕吐,结合本案例患者就诊时已是第二天晚上,生化AMY 57U/L并不升高,考虑患者就诊时血清淀粉酶可能已过高峰期。另外血淀粉酶、脂肪酶的高低与病情程度无确切关联,也存在部分病人两个胰酶并不升高的情况[2]


在工作中时常遇到急性胰腺炎、输注脂肪乳、高脂血症等导致的乳糜样血液标本,临床又急需想早点知晓患者结果的情况下,如何高效、省时、准确的出具报告是我们比较关心的话题。


1、乳糜样血常规标本处理:普通模式下白细胞加五分类计数,得到最初假性升高的HGB及MCHC结果,将血常规标本3000转离心5分钟,吸取血浆层进行白细胞计数,得到血浆层的HGB,再根据公式HGB校正值=HGB校正前-HGB血浆层×(1-HCT校正前),注意此处的HCT并不是%单位,而是带有小数点的两位有效数值。HGB校正后,需校正与之相关的参数如MCH及MCHC。


2、乳糜样血凝标本处理:先将标本进行常规模式离心,吸取乳糜样血浆层,置于无抗凝剂的子弹头,使用PCR室小型高速离心机12000转离心10分钟,取底部清亮血浆置于日立杯上机检测。


目前据自己遇到的乳糜血凝标本,采用此法后均可测得较为满意的结果。另外,血凝分析仪也有一定的抗脂血干扰能力,所以吸取底部血浆时混入少量乳糜血浆,有时并不妨碍血凝仪的检测。


3、乳糜样血清生化标本处理:第一,电解质钾钠氯若是电解质分析仪检测,则需将部分血清高速离心后,取底部血清检测,因为乳糜样血清存在电解质排斥效应,血脂和蛋白质挤占了电解质的空间,在接触电极时,仪器无法测出,电解质仪会不断地重复吸取乳糜血清测试。


第二,乳糜血清先上机检测,部分无法测出的项目(以速率法的项目较常见),采用蒸馏水稀释2到5倍,不建议稀释倍数扩大到10倍或更高,因为稀释倍数越大,误差也将越大,其次,当前生化分析仪的部分项目线性范围比较广,稀释倍数较小也能获得较好的结果。


第三,为了验证某些项目稀释后结果是否可信,稀释标本上机时可顺带同时检测终点法的血糖,以原倍血清的血糖与稀释血清的血糖做对比进行判断。如本次原倍乳糜血清Glu为18.34mmol/L,ALT、AST原倍无法测出,而稀释2倍检测Glu、ALT、AST后,ALT 10U/L、AST 28 U/L、Glu 9.15 mmol/L,可见血糖稀释前后差别不大,也间接验证ALT、AST可信。








总   结







脂血对部分常规生化检测项目结果有干扰,对使用免疫比浊法或单试剂检测时干扰很明显,使用高速离心法能简便快速地减弱干扰,提高检测结果的可靠性[3],同时高速离心法也能较好的纠正乳糜血浆对血凝的影响,在血常规方面采用普通模式离心后借鉴公式法纠正HGB不失为一个好办法。对于文献报道中的使用乙醚萃取法、PEG沉淀、脂质清除剂Lipoclear去除乳糜血清对生化的影响,较多实验室或均不具备此试剂耗材,也就较难开展对比。





【参考文献】

[1]Su-GenZeng, Ting-Ting Zeng, HongJiang, etal.A Simple,Fast Correction Method of Triglyceride Interference in BloodHemoglobin Automated Measurement.J. Clin. Lab,2013,Vol.27(5):341-345.

[2]葛均波,徐永健,王辰.内科学第9版[M].北京:人民卫生出版社,2018:431

[3]李宜铮,李丽莉,薛云松,等.高速离心法消除脂血对临床常规生化检测项目的干扰分析[J].检验医学与临床,2021,18(17):2481-2483




END


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来源: 检验医学
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