红蝶扑映脸,狼咬红斑样。 身痛如被杖,红砖体内藏。 这一天送检的一份血液标本要查红斑狼疮细胞,检验师经过一道道奇妙的工序,最终在显微镜下发现了大量的红斑狼疮细胞。 什么是红斑狼疮细胞?又是怎样神奇的工序让隐藏在血液中的红斑狼疮细胞现形的呢? 一、红斑狼疮的渊源 讲到红斑狼疮细胞就不得不说说红斑狼疮这种疾病,其实人类与红斑狼疮的探索与纠葛早已存在了数千年。 最早描述红斑狼疮的医生可能是希波克拉底,他描述的一种皮疹疑似红斑狼疮皮疹。 在我国东汉时期,张仲景在《金匮要略》中记载了一种“面赤斑斑如锦纹”、“身痛如被杖”的病症,也可能是红斑狼疮的临床表现。 到了13世纪,人们开始重视起这种异样的皮肤状况。发病后皮肤局部溃烂、红肿,像被狼咬过的皮肤病,这也是红斑狼疮名字中和“狼”扯上关系的原因。 后来人们发现,同样的红斑狼疮症状,在皮肤上出现的部位、形状等都有差异,疾病后果的轻重难以预料,也就无法估测死亡的远近,红斑狼疮的阴影神秘地笼罩着医生与病患。 直到1948年,Hagraves等在1例SLE患者骨髓涂片中偶然发现了一种吞噬了细胞核物质的细胞。这种细胞与红斑狼疮的产生有着密切的关系,于是被称为“狼疮细胞”。 狼疮细胞其实是体内免疫系统紊乱发生“敌我不分”的斗争产物。患者体内的一种狼疮因子伪装成了自身抗体,引发了一系列的误会与屠杀。 狼疮细胞的形成,是由病人体内含有的自身抗体与已经退化的中性粒细胞的细胞核作用,使粒细胞核内的DNA解聚,胞核肿胀,形成体积膨大、质地均匀、圆形烟雾状的均匀体,被活的中性粒细胞吞噬均匀体形成狼疮细胞。 二、狼疮细胞的制作 寻找藏在血液中“红宝石戒指”之旅就要开始了。这趟“旅途”竟是SLE诊断之路上的实验室检查中最简便、最经济的。静脉血找红斑狼疮细胞特异性强,在急性活动性SLE病人中70%~80%可找到红斑狼疮细胞,检出狼疮细胞是诊断SLE的重要依据。 1.制作原理: 红斑狼疮患者血液内的红斑狼疮因子(LE因子)为一种抗核蛋白的IgG抗体,它作用于细胞核抗原决定簇,并使细胞核胀大,失去原有的染色质致密结构,形成一种均匀无结构的圆形烟雾状物质,称均匀体,这种均匀体蛋白在补体作用下,被成熟的中性粒细胞吞噬后即为红斑狼疮细胞。这种现象在体外形成,故须在抽取静脉血后,给予一定的条件和在适当的温度下放置一定时间,促使其形成。经瑞-吉氏染色后,油镜下的视野可见吞噬了均匀体的红斑狼疮细胞就像红色的宝石戒指。 2.红斑狼疮细胞的形成需要有5个条件: ①人特有的抗核抗体(IgG),它能使细胞核的脱氧核糖核酸( DNA)解聚,变成可被中性细胞吞噬的均匀体。 ②供抗核抗体作用的退化的细胞核; ③活的吞噬细胞,主要是中性粒细胞。其中抗核抗体是病人特有的,它首先对细胞核起作用,为中性粒细胞的吞噬创造了条件; ④合适的作用温度; ⑤适当的作用时间。 3.注意事项: ①整个操作时间不能超过3h。经过短,狼疮细胞形成不佳;时间过长,细胞溶解过多,影响检出。 ②注意与果馅细胞鉴果馅细胞为单核细胞吞噬淋巴细胞的胞核所形成,核仍保持染色质结构和染色质特性(着紫红色) 4.操作方法: ①抽取患者血液2~3ml,注于干燥洁净试管内,于室温待凝。 ②于凝固刚形成时,用竹签将凝块搅碎,并将残余凝块除去(见图1)。 图1 用竹签搅碎凝块的操作 ③以2000r/min离心沉淀10min,使白细胞聚集在同一层面,以利于狼疮细胞形成(见图2)。 图2 离心后的静脉血 ④置37℃温箱内温育2h。 ⑤取出试管,去掉大部分血清,只留下血膜以上4㎜左右的血清(如图3)。 图3 去掉大部分血清后只留下血膜以上4㎜左右的血清 ⑥用加样枪头轻轻搅动白细胞膜层,使白细胞悬浮到血清中。 ⑦轻轻吸取悬浮着白细胞的混浊血清,使之转移到1.5ml离心管中,将离心管2000r/min离心2min,使白细胞沉淀(见图4)。 图4 1.5ml离心管装载悬浮着白细胞的混浊血清 ⑧去掉上清,取底下沉淀涂片2-3张,晾干,以瑞氏染液染色、镜检(见图5)。 图5 低倍镜视野下先观察涂片中细胞的情况(瑞氏染色,x1000) 5.结果观察: ①典型的红斑狼疮细胞是中性粒细胞胞浆内吞噬了一个至数个均匀的、已失去核的致密结构的圆形或椭圆形的均匀体,均匀体的大小约1/3到1/4个红细胞大。在细胞中呈浅紫色均匀无结构的圆形烟雾状物质为均匀体,均匀体被中性粒细胞吞噬后将深染的中性粒细胞的分叶核挤到边缘,看起来就像镶着红宝石的戒指(见图6-8)。 图6-8 箭头所指为红斑狼疮细胞细胞中呈浅紫色圆形烟雾状物质为均匀体,挤到边缘深染的为中性粒细胞分叶核 (瑞氏染色,x1000) ②孤立的圆形均匀体与上述细胞内的均匀体相同,但未被中性粒细胞吞噬,散在分布于涂片中。有时许多中性粒细胞包围一个细胞核均匀体,形成花斑样的细胞簇。全身性红斑狼疮本试验可呈阳性(阳性率达80%左右),经激素治疗后,红斑狼疮细胞常大为减少,甚至可转为阴性。 6.红斑狼疮细胞检查的临床意义: ①多出现于系统性红斑狼疮,其活动期较缓解期阳性率高。 ②胶原性疾病如风湿病、类风湿性关节炎、结节性动脉炎、硬皮病及皮肌炎等有时也可查到此种细胞。 ③未找到狼疮细胞并不能否定红斑狼疮的诊断,应进一步做其他有关免疫学检查,如抗核抗体等。 本文编辑:小珍 |