【冯仁丰】系列讲座 11 临床实验室检测结果互换性 4

临床实验室检测结果互换性

冯仁丰

互换性是参考物质的性质，参考物质被检测的值，与具有代表性的临床样品被检测的值，在相同被测量的检测程序的2个或更多个之间，具有相同的关系。当某个参考物质将被用于临床实验室检测程序的通用校准品，或将被用于质量评估（能力验证）计划去评价检测程序间检测患者样品结果的一致性时，要求互换性。当参考物质被用于某个体外诊断厂商，作为他们内部溯源性程序的一部分，为他们的产品校准品定值时，也被要求互换性。

本期杂志上，Zegers等报告了新参考物质对铜蓝蛋白互换性的研究和确认，ERM-DA472/IFCC是被制备替代ERM-DA470的。早期的参考物质以血清为基础，是15个蛋白包括铜蓝蛋白的参考物质，没有被确认互换性，但有报告改善了常规临床实验室检测程序间对数种蛋白的一致性。但是ERM-DA470没有使得病人样品中的铜蓝蛋白结果实现一致性（harmonization），因它缺少互换性。

四、铜蓝蛋白未被批准为ERM-DA470k/IFCC一个成分的原因

在候选的参考物质和它们对参考物质互换性中，因在候选参考物质中的铜蓝蛋白存在了非典型异构体导致了阴性影响。在为ERM-DA470k/IFCC确定特性时，相对于ERM-DA470/IFCC校准时,有两组常规方法，它们的结果差异约10%。在这两组常规方法间有着相同大小和方向的差异，在EQAS计划中也观察到该差异。但是，在研究中包括的所有常规方法，均相对于ERM-DA470/IFCC校准的。

以CRM 470校准后，检测ERM-DA470k内铜蓝蛋白的表现

这个非典型异构体可被两组最佳常规方法检出有显著差异。CRM 470中的铜蓝蛋白看来更多的像天然的血清样品。非典型异构体组分的多少会影响检测结果。在CRM 470中，没有被充分地予以确定特性，导致至少有一组常规方法引入了未被控制的校准偏移。CRM 470不适合作为铜蓝蛋白的校准品，为ERM-DA470k/IFCC定值，在ERM-DA470k/IFCC中，至今未对该蛋白予以确认。正在进行研究期望解决这个问题。 

2009年UK NEQAS的铜蓝蛋白调查 

结果也显示了报告浓度很宽的范围，虽然在比例上的差异（即一个样品与另一个样品的值的比率）较CRP要少一些。

决定铜蓝蛋白不是ERM-DA470k/IFCC中一个确认蛋白的原因。自新的ERM-DA470k正式发布以来，Zegers等为了更多了解铜蓝蛋白为什么不能被确定为该参考物质中一个确认的蛋白，按照CLSI的EP30-A文件进行了互换性实验。实验观察的结果大致如下。

制备ERM-DA470k/IFCC替代ERM-DA470时，需要确认ERM-DA470k/IFCC的铜蓝蛋白浓度。定值由13个实验室参与，使用了BN ProSpec、BNⅡ、Olympus AU640、Immage、Abbott、和LX-2200等检测系统，Hitachi使用了Roche和Dako试剂。这些检测均以ERM-DA470校准。对新鲜病人样品检测发现：Immage和Abbott方法得到高值，而Olympus、Roche、和Dako Hitachi方法给出低值。在还不能充分了解问题原因前，制备者作出了不列入铜蓝蛋白的决定。

互换性实验安排：被检测的人血清样品，有被添加了叠氮钠、储存于-70℃15个月的“陈旧”血清30份；也有新鲜的血清样品，即不添加任何防腐剂与深低温保存的。

参考样品：

ERM-DA470 ，1993年制备[14个蛋白]

ERM-DA470k/IFCC（冻干品） [12个蛋白]

ERM-DA472/IFCC （深低温液体）[CRP]

注：上述均为检测系统间经ERM-DA470校准后，新鲜病人样品比对的斜率。1为具有互换性，0为毫无互换性。

实验说明缺乏互换性所有检测系统对于ERM-DA470的铜蓝蛋白定值很接近确认值，0.205 g/L，扩展不确定度为0.011 g/L。说明每个检测系统均具有良好的溯源性，可溯源至ERM-DA470。但是它们在检测新鲜病人样品时，两两检测系统间比较的回归斜率差距，只能说明ERM-DA470在检测系统间缺乏了相当的互换性。Zegers发现，参考物质ERM-DA470中的铜蓝蛋白表现很类似陈旧的病人样品（即添加过叠氮钠、置低温-70℃保存15个月以上）。以陈旧ERM-DA470作为新鲜EQAS样品结果的溯源性基础时，方法间的变异很高。但陈旧ERM-DA470为陈旧（aged）EQAS样品提供溯源性时，方法间变异非常小。也发现新参考物质ERM-DA470k/IFCC表现像新鲜病人样品。