以案为鉴！从临床案例看“假熊猫血”的检测前提与方法

归去来兮 2022-1-18 05:27 PM 4491人围观技术

暨南大学附属广州市红十字会医院曹拓

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“熊猫血”既Rh阴性血的别称，寓意犹如熊猫一般稀有、珍贵，这也是绝大多数人对其最直观、通俗的认知。那么，又有多少人听过“假熊猫血”呢？熟不知，“熊猫血”也存在真假之分，而鉴别方法须借助更加敏感的吸收放散实验及更特异的基因检查。尤其对于孕产妇而言，辨别“熊猫血”的真伪在RH新生儿溶血、抗体监测等方面都具有重要意义。今天，我们就以一个临床案例为题带给大家一场关于真假“熊猫血”的科普。

案例

某日，临床反馈，一名待产的孕妇血型检验报告有误，检验科报告显示Rh阴性，血液中心报告却是Rh阳性。对于待产的孕妇而言，Rh阴性血（熊猫血）意味着什么？首先，由于血型稀缺，生产时可能面临的严重出血风险及输血救治需求将会给临床带来很大的压力；其次，由于可能存在母胎Rh血型不相合，致使孕期或产后发生胎儿或新生儿溶血（这种情况见于已被致敏的Rh阴性的产妇，包括此前已生育一胎或者发生过流产及输血史）。那么，临床为了避免胎儿或新生儿溶血的发生就会对Rh阴性的孕妇进行预防性肌注抗D抗体。

笔者找出报告Rh阴性结果的孕妇血标本及最近一天（不同日）的血常规标本进行复核。凝胶微柱法（单克隆抗体）及玻片凝集法结果都显示为Rh阴性，且两份不同日的标本结果一致。图A及图B为凝胶微柱法及玻片凝集法，图C为玻片凝集法显微镜下无凝集状态。

图A（凝胶微柱法）

图B（玻片凝集法）

图C 显微镜观察抗-D玻片凝集实验

那么，血液中心是如何报告的呢？方法学如何？于是，找回了血液中心给出的报告。如图D，的检测结果为亚洲型DEL（D抗原阳性）、具有吸收抗-D能力、具有放散抗-D能力。综合结论是Rh阳性（亚洲型DEL）。那么，对于这类结果如何理解？对于这类孕妇如何对待与管理呢？

图D 血液中心RhD阴性确证实验报告

解析

DEL表型是一种极弱表达的D抗原，与正常RhD阳性个体单个红细胞表面有10,000-30,000个RhD抗原相比，其单个红细胞表面RhD抗原数量通常<30个，这导致该血型红细胞与常规使用的抗D抗体不能产生凝集反应，即常规的RhD血型检测结果为RhD阴性血型，只有通过D抗原的吸收放散实验才可以检测出，因此也叫DEL抗原。DEL表型（RhD放散型血型）也是最常见的RhD变异型血型。传统检测方法中，吸收放散实验可以将其鉴定出来，但是吸收放散实验由于存在消耗抗体多、操作过程费时费力、对操作技能要求高等问题，制约了其常规应用于临床检测。所以长期以来，DEL血型个体一直未被正确鉴定出来，长期被作为RhD阴性个体对待。

为什么叫亚洲型DEL呢？与欧洲、非洲人群不同，亚洲的Rh阴性人群中DEL表型比例很高。与白种人及黑种人中DEL血型的罕见分布相比，中国人群的RhD阴性个体中，有20-30%的比例为DEL血型，即假RhD阴性血型（所谓假熊猫血），并且其超过95%的个体的分子遗传背景均为RhD基因1227A位点突变。而本案例中血液中心针对RhD阴性所做的确证实验就是基于分子遗传的基因序列做了高分辨率溶解曲线分析，结果证实是亚洲型DEL。

RhD基因1227A位点突变对于临床的意义究竟如何？其实，由1227A位点突变造成的DEL血型个体红细胞表面RhD抗原表位完整,也就是说该抗原表位的存在可以使得机体不会针对于它产生抗体（抗-D抗体），因此输注RhD阳性血或孕有RhD阳性胎儿，不会产生抗D，应该作为RhD阳性个体对待。既然这样，对于临床的指导意义就清晰了：

DEL血型患者不必要输注长期短缺的RhD阴性稀有血液，其输血原则按常规的RhD阳性对待即可，这不但可为患者节约输血费用（RhD阴性血液不仅长期短缺，而且费用为普通血液的三倍），也可以节约20-30%宝贵的RhD阴性血液，满足真阴性患者的需求；此外，对于DEL血型孕妇，其胎儿也不存在RhD新生儿溶血病的风险，其DEL血型的准确鉴定，可以减少孕期不必要的频繁血型抗体的监测，由于其不会产生抗D，也可以避免不必要的医疗干预（主要措施是注射昂贵及来源困难的抗D免疫球蛋白）来预防抗D产生。

总结

那么，一个“假熊猫血”案例给我们检验或临床医务工作者带来哪些启示呢。对于常规检测为RhD阴性患者，由于亚洲人群中DEL表型比率较高，需要进一步确证其阴性的可靠性（尤其是孕妇），这包括做更加敏感的吸收放散实验及更特异的基因检查。对于试剂及仪器研发及生产商而言，需要找到更便捷或符合临床工作的的方法来弥补现阶段常规检测的不足。

[1]叶应妩，王毓三，申子瑜，等.全国临床检验操作规程.南京：东南大学出版社，2006：258-261.

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[3]章旭，林凤秋，李剑平，等.DEL型个体抗体筛选的调查分析.中国输血杂志，2009，22（10）：796-799.

[4]国内首创！我中心临床输血研究所开展RhD放散型血型检测啦！广州血液中心

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来源: MIR医学仪器与试剂

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