作者:张国华 单位:上海市金山区亭林医院检验科 血常规检查是我们检验科最常见、也是临床医生最常开的三大常规检查之一,血常规检查有助于判断贫血、白血病、细菌感染和病毒感染等各种血液疾病。随着血细胞分析仪尤其是具有五分类能力的血细胞分析仪的应用越来越广泛,不仅在很大程度上提高了血常规检查的质量和效率,而且能够满足临床诊断和实验要求。 然而,由于血细胞分析仪检测方法的局限性,极易造成某些检验项目假性升高或降低,甚至出现检测错误或漏检,有时会给临床提供不可靠的检测结果,继而导致漏诊或误诊的现象偶尔发生。因此,制定严格的血液复检规则刻不容缓,国际上41条复检规则由此产生[1]。之后国内各大医院根据厂家和仪器型号不同分别制定了与之对应的复检规则,减少了检验结果的差错率,使检验质量得到了保证。现将发生在我科的一个检验案例报道如下,以供检验同道参考和借鉴。 图1 为了防止仪器出现差错,我们将血常规标本放入另一台仪器迈瑞BC-6800 Plus复做。复做结果让人大跌眼镜,如图2所示,BC-6800 Plus第一次复做结果提示白细胞为15.21×109/L,红细胞为1.99×1012/L,血红蛋白为80g/L,红细胞压积为23%,血小板为764×109/L。而BC-6800 Plus第二次复检结果与第一次无明显差别(我科BC-6800 Plus有两台仪器,触犯复检规则会自动放入第二台仪器重新检测一遍)。
BC-5390与BC-6800 Plus同为一个厂家,检测结果比较,除了白细胞结果相差较大外,其余结果差别不大。 图2 图3
难道是有核红细胞干扰造成白细胞假性升高?于是放入机器推片染色和镜检。经过一段时间的机器推片染色结束后,我迫不及待地拿出血涂片放入阅片机观察细胞形态。细胞形态如图4和图5所示,可见有核红细胞且以中幼红细胞和晚幼红细胞居多,红细胞大小不一,各种红细胞异常形态如球形红细胞、靶形红细胞、口形红细胞、棘形红细胞等多见。 果然如我所料,大量有核红细胞干扰了白细胞计数结果,导致了白细胞假性升高。询问患者得知,患者来我院前曾去过上海市瑞金医院检查,确诊为自身性免疫性溶血性贫血。而根据患者血常规检查的结果及细胞形态也确实符合溶血性贫血的诊断。 图4 图5 于是手工计数有核红细胞个数,根据公式:校正后白细胞数=校正前白细胞数×100/(100+有核红细胞数),即实际WBC数=仪器WBC数×100/(100+NRBC),计算得出WBC为15.2×109/L,如图6所示,手工计数结果与BC-6800 Plus检测结果很接近。 图6 迈瑞BC-5390的检测原理是采用激光流式细胞技术,血细胞在激光的照射下会产生散射光,低角前向散射光反映的是血细胞的大小,而高角前向散射光反映的是细胞内部精细结构和颗粒物质,最后根据细胞的大小和结构对白细胞进行分类。这样的检测原理容易把有核红细胞当做淋巴细胞,从而导致白细胞假性升高。 迈瑞BC-6800 Plus的检测原理是采用鞘流阻抗法和激光散射结合荧光染色的流式细胞技术,对白细胞进行分类和计数,BC-6800 Plus能够对幼稚细胞特别是有核红细胞进行精准的识别和检测。[2] 随着仪器越来越先进,有些机器可以自动校正白细胞数,某些仪器有NRBC通道也可以区分有核红细胞和白细胞。但是仪器的自动校正未必得到准确的结果,最好还是要手工计数白细胞数。 手工校正白细胞数具体操作:在油镜下计数100个白细胞数时计算有核红细胞个数,然后用校正公式[校正后白细胞数=校正前白细胞数×100/(100+有核红细胞数)]计算得出白细胞数。[3]
此外,溶血剂只能破坏有核红细胞的细胞膜而不能破坏细胞核,有核红细胞会被仪器归类为淋巴细胞从而计入白细胞总数里,所以白细胞校正后必须重新分类。 有核红细胞和难溶红细胞可以导致白细胞假性升高,白细胞聚集和冷凝集(红细胞聚集)可以造成白细胞假性降低。[4]正常人一般不会出现有核红细胞,有核红细胞常见于溶血性贫血、急性失血、白血病、恶性肿瘤、严重组织缺氧和骨髓纤维化等疾病。[5]
本案例中患者有自身免疫性溶血性贫血,外周血中出现有核红细胞,其中以中幼红细胞和晚幼红细胞居多提示红细胞代偿性增生,仪器误把有核红细胞当做白细胞从而造成了白细胞假性升高,必须要校正白细胞数并对其进行重新分类才能得到最可靠的结果。 虽然血细胞分析仪能够给我们带来简便快速的结果,在一定程度上提高了我们的工作效率,但是仪器也有其局限性,有时未必能够给我们带来准确可靠的结果。
作为检验人,我们必须结合直方图和散点图以及镜检查看细胞形态,通过加强自身的责任心和提高形态学辨识能力以及建立完善的复检规则,保证检验结果的准确性,对自己负责、对标本负责、更要对患者负责,努力做一名合格的检验人。
【参考文献】 [1]Clinical Hematology, Department of Laboratories, Barnes-JewishHospital, St. Louis, Missouri, USA. The international consensus groupfor hematology review:suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential analysis. [2]田雪梅,牛莉莉,张鑫.迈瑞BC-6800血细胞分析仪的性能验证[J].新疆医学,2015,(2):197-200. [3]尚红,王毓三,申子瑜. 全国检验操作规程(第四版)[M]. 全国临床检验操作规程(第四版). [4]林萍,谢若腾,郑静.EDTA抗凝剂依赖性假性白细胞减少一例[J].中华医学杂志,2017,97(30):2393-2394. [5]陈海生.,外周血有核红细胞自动检测应用研究[J].现代医院,2011, 11(6): 69-70. |