全面了解并准确去除临床标本中的干扰物质的正确姿势

归去来兮 2021-9-29 02:39 PM 1606人围观技术

人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的Fc段直接结合，从而导致假阳性。

输入类风湿因子干扰的排除

嗜异性抗体

嗜异性抗体(Id)是由低纯度抗原引起的，又称之为对非特异性抗原产生的抗体应答。

天然的嗜异性抗体（IgG）可分为两类:

一类（85%的假阳性或假增高由其引起）可结合于山羊、小鼠、大鼠、马和牛IgG的Fab区域，但不与兔IgG的Fab区结合。
另一类（15%的假阳性或假增高由其引起）可结合于小鼠、马、牛和兔IgG的FC区表位，但不与山羊和大鼠IgG的FC区表位结合。嗜异性抗体可通过交联固相和酶标的单抗或多抗而出现假阳性或假增高反应。
其也可造成假阴性或假降低的结果。

嗜异性抗体干扰的排除

使用特异的兔F(ab’)2片段作为固相或酶标抗体。

在标本或标本稀释液中加入过量的动物Ig，封闭可能存在的嗜异性抗体。但加入量不足或亚类不同时无效。

使用靶特异的非Ig亲和蛋白（Affibody）替代固相或酶标抗体之一。采用噬菌体展示技术展示来自单个金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）联合文库的人IgA结合亲和蛋白，用于IgA的测定，不受异嗜性抗体的影响。

使用特异的鸡抗体作为固相和测定抗体。

人抗动物（如小鼠、免、羊等）抗体

人抗小鼠抗体（human anti-mouse antibodies, HAMA）：抗鼠抗体对使用鼠源性单克隆抗体的免疫测定，可产生假阳性（定量检测假增高）或假阴性（定量假降低）结果。

干扰排除的方法

使用特异的抗体F(ab’)2片段作为固相或测定酶标抗体。

在标本或标本稀释液中加入过量的鼠Ig，封闭可能存在的抗鼠抗体。

使用特异的鸡抗体IgG作为固相和测定抗体。鸡IgG不与人抗鼠抗体反应。因而，用其作为固相或酶标抗体不会出现假增高或假降低结果。

自身抗体