目前国内大多数医院都在开展非侵袭性实验室技术如G试验和GM试验,成为真菌感染的诊断标准之一,以提高真菌感染的阳性率。但G试验、GM试验在诊断真菌感染中究竟有多大意义?两者有何区别?本文做一阐述。 1、G试验:又称1,3-β-D葡聚糖试验,检测的是真菌的细胞壁成分1,3-β-D葡聚糖,人体的吞噬细胞吞噬真菌后,能持续释放该物质,使血液及体液中含量增高。1,3-β-D葡聚糖可特异性激活鲎变形细胞裂解物中的G因子,引起裂解物凝固,故称G试验。 2、GM试验:检测的是半乳甘露聚糖(glactomannan,GM),半乳甘露聚糖是广泛存在于曲霉和青霉细胞壁的一种多糖,菌细胞壁表面菌丝生长时,半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放,是最早释放的抗原,可以通过酶联免疫吸附试验法进行检测。 1、G试验、GM试验连续2次阳性为有意义的检查结果。 2、G试验:适用于除隐球菌和接合菌(毛霉菌)外的所有深部真菌感染的早期诊断,虽能测得包括曲霉和念珠菌在内的更多致病性真菌,且初步的临床研究显示有较好的敏感性和特异性,假阳性率较低,但它只能提示有无真菌侵袭性感染,并不能确定为何种真菌感染,这是此方法的缺陷。 假阳性: (1)使用纤维素膜进行血透,标本或患者暴露于纱布或其他含有葡聚糖的材料; (2)静脉输注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品; (3)链球菌血症; (4)操作者处理标本时存在污染。另外,使用多糖类抗癌药物、放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等也可能造成假阳性。 3、GM试验:主要针对于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。曲霉菌感染部位主要集中在肺部,从而引起肺部侵袭性曲霉,诊断曲霉菌在肺部是定植还是侵袭性生长,关键在于其是否合成GM。GM试验常可在患者临床症状出现前5-8d获得阳性结果,并可对血清、脑脊液、肺泡或支气管灌洗液进行检测,因而往往可以使诊断提前。 假阳性: (1)使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦; (2)新生儿和儿童; (3)血液透析; (4)自身免疫性肝炎等; (5)食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情况可出现 假阴性: (1)释放入血循环中的曲霉GM(包括甘露聚糖)并不持续存在而是会很快清除; (2)以前使用了抗真菌药物; (3)病情不严重; (4)非粒细胞缺乏的患者。 三、临床应用注意 1、G 试验和 GM 试验检测的物质不同,代谢规律存在差异,影响因素也有较大差别,二者不能互相取代。二者联合应用可以提高对侵袭性真菌病的诊断能力。 2、GM 试验和G试验均存在假阳性结果,可以通过多次检测来降低假阳性率。因此,G 试验和 GM 试验阳性的病例仍需结合临床表现综合判断是否存在真菌感染。 3、临床上经验性治疗早期应用,会使血清 GM 浓度降低,出现假阴性,连续 2次血清 GM 阳性的标准不易达到,会给临床医生带来困惑。 4、影响 GM 试验结果最常见的因素为 β-内酰胺类抗菌药物的使用,尤其是哌拉西林/他唑巴坦,因此在检测曲霉菌半乳甘露聚糖时,应避免给患者使用此类药物。
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