警惕钩状效应

作者 | 董晓田

单位 | 浙江大学医学院附属第一医院

钩状效应是指应用免疫学技术检测抗原或抗体时，由于抗原或抗体过量，导致假阴性结果的现象^[1]。当抗体过量时称为前带现象，抗原过量时称为后带现象。因此，确定反应体系中抗原抗体的比例关系十分重要。

本文报告一例多发性骨髓瘤患者免疫球蛋白A（IgA）和血清游离轻链λ（FLC-L）由于钩状效应引发的假阴性结果，以及如何处理来发出相对准确的报告。

患者，女，42岁，两月前因无明显诱因下胸背部疼痛至当地医院查胸部CT示胸骨、肋骨多发斑点状低密度影，PET检查示全身骨骼广泛骨质破坏，骨髓瘤首先考虑，为求进一步诊治来我医院就诊。患者入院后经过骨髓病理和免疫固定电泳检查明确诊断为多发性骨髓瘤IgAλ型。

值得注意的是，患者血清免疫球蛋白和血清游离轻链原倍测定结果并不支持临床诊断，这引起了实验操作人员的关注。随后我们用纯水对该血清进行了1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128系列倍比稀释后重新上机检测，换算后的结果如下：

通过查看说明书指示IgA检测线性范围为0.1-7g/L，去掉线性范围外的数值后绘图如下：

通过折线图，可以直观的看到两个项目存在的钩状效应，红色圈里的数值才是最接近患者真实结果的数值。

该案例中的钩状效应是由我们所熟知的带现象引发，容易造成假阴性的结果，及时发现并正确处理是保证检验准确性的关键。除此之外，样本是否有溶血、脂浊、黄疸，样本是否有自身抗体、嗜异性抗体等以及临床治疗使用的部分药物都会对免疫透射/散射比浊法产生干扰。

目前针对钩状效应的应对策略有：1）样本预稀释；2）样本或试剂的二次添加；3）识别异常反应曲线并报警拦截^[2]。在本案例中，IgA是在罗氏cobas8000流水线上采用免疫透射比浊法检测，而FLC-L是在BNII特定蛋白分析仪上采用免疫散射比浊法检测。前者通过设置预稀释和监视反应曲线对本案例中发生的钩状效应成功进行了拦截，但BNII并没有任何报警，相对更容易导致错误结果的发出。

多发性骨髓瘤是骨髓内浆细胞异常增殖的一种恶性肿瘤，常伴有单克隆异常免疫球蛋白（M蛋白）增多，引起相关器官功能损伤（CRAB）。目前医学技术并不能完全治愈，化疗加干细胞移植中位生存时间也仅5年，是一种严重危害人类健康的血液系统恶性肿瘤。

多发性骨髓瘤通过血液、尿液、骨髓、影像学等相关检查不难诊断，其中血清游离轻链检测对疾病诊断和预后分层均有较强价值，有利于患者疗效评估和监测复发。

本案例中，实验室检查对于患者确诊至关重要，这要求实验室检测结果必须准确无误。从实验人员角度，审核报告时要知其然并知其所以然，防止错误结果误导临床的诊治。从试剂商和仪器商角度，要提前设置预警机制，怀疑有各种干扰发生时及时报警，有助于实验人员更高效准确的处理异常结果。

点评专家：陈保德，副主任技师，浙江大学医学院附属第一医院检验科

多发性骨髓瘤的及时诊治对于患者良好预后非常重要，血清游离轻链检测灵敏度高，方便预后监测，是多发性骨髓瘤临床诊治过程中常用的项目，该项目的准确检测尤为重要。由于钩状效应造成的假阴性结果需要我们实验技术人员及时发现，并正确处理，为临床提供可靠结果，更好服务患者和临床。

【参考文献】

[1]陈华根,刘冰.规范使用“带现象”和“钩状效应”概念.中国输血杂志2006(03):218.

[2] 贾珂珂,孙文苑,聂睿,崔丽艳.免疫透射比浊法常见干扰因素的识别与应对策略.检验医学2021,36(04):362-368.