高效液相色谱( HPLC )应用

高效液相色谱法，简称HPLC，是一种用于鉴别混合物中物质的方法。

HPLC有几种类型，如反相、变性和固定化酶反应器( IMER ) HPLC。

HPLC的类型可以有很大的不同，无论是在它们实现了什么以及如何实现。这从根本上影响了HPLC方法的应用方式和时间，但总而言之，HPLC已被证明在诊断目的和制药工业中是有用的。

儿茶酚胺如肾上腺素和多巴胺对许多生物功能非常重要。分析它们的前体和代谢产物可以为帕金森氏症、心脏病和肌营养不良症等疾病提供诊断。

然而，考虑到这些分子在生理上的广泛分布，他们的分析和随后关于患者健康的结论必须小心谨慎。HPLC具有比其他技术更高的分离和比较分子的能力，这使得它成为用于这种诊断目的的很好的候选者。

反相高效液相色谱( RP - HPLC )是一种比较流行的方法，因为它具有速度快、柱稳定和分离多种化合物的能力。

HPLC中分子的鉴定是通过测量保留时间来完成的。保留时间是指分子通过装有吸附剂的色谱柱所需的时间，吸附剂与不同分子的相互作用不同。这是在不同的条件下完成的。1976年，显示了RP - HPLC在诊断环境中的潜在用途。

研究人员利用疏水特性在同一运行中分离儿茶酚胺代谢物和胺，从而加快了这一过程。这部分归因于与pH的相互作用，因为酸性儿茶酚胺代谢物在低pH值下保留更长时间，而胺则相反。

HPLC协议中可以修改几个条件和设置。然后，HPLC不仅可用于检测上述疾病，还可用于监测疾病的进展。

嗜铬细胞瘤是交感神经系统的潜在致命肿瘤。它来源于神经嵴的组织，这意味着它分泌儿茶酚胺。它可以引起高血压，这可能使诊断复杂化，因为它可能只在代谢物的形式上不同于高血压。

这使得HPLC非常适合于诊断，但是待分析样品的来源会影响结果。尿样将反映中枢神经系统和外周代谢产物。

使用脑脊髓液提供更局限于中枢神经系统的结果，因此是优选的。

随着药品的广泛生产，立法来确保药品的正确生产和纯度。HPLC是全球验证药物纯度最常用的方法之一。

它在工业规模评估药物中的使用始于20世纪80年代，尽管在一些国家它的使用很普遍，但更不普遍。

这可能是由于成本。HPLC能够为工业标准提供足够的精度，但只有在校准测试之前。这可能会增加成本，但这种牺牲会导致高准确度和特异性。

这意味着HPLC比其他方法更有利于确保纯度。以前使用多晶化法，但有浪费昂贵药物的缺点。高效液相色谱效率更高，最大限度地减少了制药企业的损失。

即使在制药工业开始使用HPLC时，该方法也显示出其实用性。HPLC用于生物碱、抗生素和类固醇的分析。

特别是类固醇，由于药物剂量低，而且它们经常出现不切实际的形式(乳膏和软膏剂)，以前分析起来有些困难。

早期的讨论集中在所使用的检测器上，这一争论仍在继续并不断发展，但鉴于目前可用的方法众多，争论比以往复杂得多，并且可以根据所考虑的HPLC类型而变化。

HPLC不仅用于成品药物的分析。因为HPLC可以分离化合物，所以它也在制造过程中应用。

通过这种分离，HPLC可以为新药的生产提供关键的起始产品，或者为有潜力被制造成药物的分子的表征提供关键的起始产品。

这些铅化合物可以来源于植物、动物或真菌。HPLC可用于使用手性固定相( CSPs )分离对映体，即彼此镜像的分子。

证明对映体分子纯度的能力是药物分析中的标准，HPLC适用于该标准。

在药物化学中最常用的CSPs是苯甲酸多糖和苯氨基甲酸酯衍生物。