那年九月,金风送爽,丹桂飘香。微生物检验江湖却是风云激荡,各方大侠众说纷纭,一干检验猿神色慌张,神马情况?居然是李斯特氏菌的鉴定出了状况! 原来有个能力验证,“食品中单增李斯特氏菌的检测”, 这项目可是个A类能力验证,各路诸侯不敢大意,打起十二分精神,LU起袖子加油干,可偏偏还是出问题了! 编号为V的样品,在李斯特氏菌显色培养基上没有可疑菌落。编号为Q的样品,在显色培养基上菌落形态如下:蓝色、边缘整齐带有白色晕圈,翻看一下显色培养基的说明书,这是单增李斯特氏菌的典型菌落! 挑取典型菌落,纯培养后进行生化筛选试验,发酵鼠李糖不发酵木糖。染色镜检,显示为革兰氏阳性短杆菌。半固体培养基上呈伞状生长,动力试验阳性。这些试验,都符合单增李斯特氏菌的特性。 上机进行生化鉴定,结果竟然是英诺克李斯特氏菌!这是肿么回事捏? 进行溶血试验,结果是不溶血!难道就报告未检出单增李斯特氏菌? 到底怎样报结果啊?这可是A类能力验证,结果不满意,老板可是要大开SHA戒滴,那可就真成 “XUE案” 了。 检验猿不禁有些慌了…… 换一批新鲜血平板试一下,终于溶血啦!并且是典型的窄小β溶血环! 看来溶血试验的关键是:血平板的质量!血平板的质量!血平板的质量!重要的事情说三遍! 建议使用新鲜的血平板!使用前必须进行技术验收,还要加上阴阳性对照。有文献报道,用马血平板观察单增李斯特氏菌的溶血,效果更佳,有兴趣的检验猿不妨试一试。 至此,“XUE案”倒是破了,那生化鉴定怎么破? 换用梅里埃API Listeria测试卡鉴定试一试,凑是单增李斯特氏菌!结果妥妥滴!! 文献上说,这API Listeria测试卡,物美价廉,用来鉴定单增李斯特氏菌,真真是极好的! 特别需要说明的是测试卡中的DIM孔,是检测芳基酰胺酶的,这可是梅里埃的专利,专门用来区分英诺克李斯特氏菌与单增李斯特氏菌。顺便说一句,这DIM其实就是Differentiation Innocua Monocytogenes的缩写! 另外,测试卡中的木糖、鼠李糖生化试验,可以区分斯氏李斯特氏菌与单增李斯特氏菌;而测试卡中的磷酸葡萄糖生化试验,可以区分伊氏李斯特氏菌与单增李斯特氏菌。所以,在一些国外的权威方法,对于单增李斯特氏菌的鉴定,协同溶血试验cAMP一般是要做的,若是采用API Listeria鉴定单增李斯特氏菌,cAMP可以选做! 至此,The case is closed,结案! 【参考文献】 1、Fujisawa T , Mori M . Evaluation of media for determining hemolytic activity and that of API Listeria system for identifying strains of Listeria monocytogenes.[J]. Journal of Clinical Microbiology, 1994, 32(4):1127. 2、Beumer R R, Mtc K, Rombouts F M, et al. confirmation and identification of listeria spp[J]. Letters in Applied Microbiology, 2010, 22(6):448-452. 3、Bille J, Catimel B, Bannerman E, et al. API Listeria, a new and promising one-day system to identify Listeria isolates[J]. Appl Environ Microbiol, 1992, 58(6):1857-1860. 4、USFDA. Bacteriological Analytical Manual. Chapter 10 Listeria monocytogenes [EB/OL]. [2020-03-18]. https://www.fda.gov/food/laboratory-methods-food/bam-detection-and -enumeration -listeria-monocytogenes |