生化检测试剂根据仪器是否只能使用本公司试剂分为封闭式和开放式。 封闭式生化试剂是仪器与试剂配套使用,试剂装机需要试剂条码。部分封闭式试剂条码有固定测试数,试剂盒为整盒上机使用,不能新旧试剂合并,试剂批号更换需定标才能检测,试剂稳定性较好,检测结果更准确。但为避免仪器中途频繁停机加试剂,仪器需有足够的试剂位。 开放式生化试剂是仪器与试剂由不同厂家分开提供服务。医院在选择生化仪器时,仪器是否支持开放式试剂非常重要,如能支持开放式试剂,医院检验科在试剂使用方面有了更多地选择,可综合衡量试剂价格、室内质控结果的稳定性、试剂载机有效期再做决定。 开放式试剂虽有试剂厂家可选择、价格低廉、可控载机量等优点。但也存在新旧试剂混用、不同批号试剂混用、试剂容易污染等不足之处(注:有些封闭式试剂也同样可新旧试剂混用),会直接影响检验质控结果。 如何才能减少试剂开瓶后的污染,延长试剂开瓶后的衰变过程,既要保证检测结果的准确性,又要避免试剂浪费,这成为检验科生化室较关注的问题之一。 本科使用的生化仪器为贝克曼AU5800,试剂为开放式试剂,如何用好开放式生化试剂,本文就工作中的体会做以下探讨: 生化试剂许多项目为双试剂使用,分为R1、R2,双试剂尽量不要混成单试剂,例如酶法检测肌酐的生化试剂,第一步反应中的酶要和样品中内源性肌酸反应,清除内源性肌酸的干扰;如果混成单试剂,则会使检测结果偏高。 清除法HDL-C、LDL-C检测试剂也不能混成单试剂,因为它们反应的原理基于脂蛋白与表面活性剂的亲和性差异,先清除HDL或LDL以外的脂蛋白后,再与R2试剂反应,得出HDL-C和LDL-C检测值,如果混成单试剂,会导致检测结果不准确。 另外,有的试剂混成单试剂后,载机稳定性和抗干扰性能也会明显下降。 1、在试剂位置允许的情况下尽量使用双试剂; 2、如一定要使用单试剂,最好选择试剂厂家专门生产的单一试剂。 在实际工作中,经常会将不同批号的试剂混合在一起使用,这一方面是为了节省成本,另一方面是为了方便。但是不管什么厂家的试剂,由于批号不同,生产时间也不同,出现试剂中工具酶的活性不一样、底物浓度不一致的现象。如不同批号试剂混在一起使用而又没定标,可能会出现室内质控失控。 1、不同批号试剂建议不要混用,如果混用最好重新定标; 2、或者将每个批号的剩余试剂先暂时放冰箱冷藏,待一定数量后混在一起重新定标后检测。 随着全自动生化分析仪的普及,“开瓶稳定性”也随之受到了大家的重视,但是就目前试剂方法学来讲,还达不到人们所要求的试剂开瓶后在仪器内放很长时间不需要定标,未开封的生化试剂效期通常为1年,而开瓶载入仪器后效期则往往只有数天至1个月,甚至更短[1]。 主要原因是试剂开瓶后,长时间与空气接触,发生氧化或还原、结晶或受细菌污染,试剂有效成分逐渐降解。 试剂的轻度衰变可采用定标的方式纠正,而对于衰变严重的试剂则实验室只能通过提高试剂的更新频率来解决,或以降低质量控制标准为代价。 比如苦味酸法检测肌酐、TP、ALP等pH为碱性的试剂,开瓶后试剂会吸收空气中的二氧化碳,使试剂本身的pH值下降,如果长时间开瓶不定标,会使检测结果发生偏离,导致检测结果的不准确[2]。 1、对室内质控结果不稳定的试剂及时定标; 2、有些检测样本数较少的试剂,可按1~2天的用量取用试剂放入仪器。 使用开放式试剂,每天最耗费时间的事情是什么?定标?质控?NO!是倒试剂。 生化检测项目较多,少则二三十,多则四十个以上,使用全自动生化分析仪进行检测前,往往要估计当天的样本量,把不够的试剂补足。 虽然有些生化分析仪可不停机随时添加试剂,然而大部分生化分析仪在工作时不能添加试剂的,只有当仪器处于待机状态时才能添加,为了避免中途停机加试剂,试验前需将不够的试剂补足[3]。 倒试剂的方式各种各样,你用的是哪一种? 批号不同的试剂前面已讲,以下所举例子均为同一批号试剂: 这是用得最多的方式,因为方便省时,但不省心。因反复将试剂倒入同一试剂瓶中使用,灰尘和细菌渗进瓶子里,有些试剂中含有蛋白质和盐,构成细菌生长有利的环境,就算是有的试剂加了防腐剂成分,但是防腐剂的防腐是有局限性的,易造成试剂污染而室内质控失控,影响临床检测结果的准确性。建议试剂瓶在仪器内载机时间不要过长,及时更换。 这种方法可将试剂瓶更换,并且把沉淀丢弃,因为有些试剂与塑料瓶器皿接触时间一长,就可能发生沉淀。适用于测试数较多的试剂如ALT、AST等,因试剂消耗较快不易造成污染。 这种方法质控结果会较好,但试剂难免会造成浪费,较少采用,除非你所在科室很土豪。 有些检测项目测试标本少,如FMN、HbA1c、免疫球蛋白等,不宜放置整瓶新试剂。这种方法较为费时繁琐,但尽可能的减少了试剂浪费,又使质控结果得到了保证。长时间不清洗试剂瓶,难免会对试剂造成污染。如同品茶的茶杯,如果长时间不清洗杯子,茶水味道也会不好。 对极易污染的生化检测试剂如HDL-C、LDL-C,采用双瓶双位,即同一项目的试剂R1、R2分别在仪器上设置两个位置同时放两瓶,这样可避免试剂反复倒入造成污染,试剂用完旧瓶丢弃,放入新瓶使用。 如何才能减少试剂开瓶后的污染,延长试剂开瓶后的衰变过程,既要保证检测结果的准确性,又要避免试剂浪费,是检验科生化室较关注的问题之一。此文从长期的实际工作经验出发,根据不同检测项目的试剂使用具体情况采取相应措施,尽量减少了生化试剂的浪费及污染,保证检验结果的准确性。 【参考文献】 [1]韩志钧.临床化学常用项目自动分析法[M].沈阳:辽宁科学技术出版社, 2005:998—1000. [2]罗侃,崔有宏,张大高 ,主编.临床化学方法学评价[M].兰州:兰州大学出版社 ,1996. [3]曾平,刘运双,罗军,等.全自动生化分析仪试剂添加方法对试验结果的影响[J].国际检验医学杂志,2006,27(8):759. |