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“金标法”——医学检验的阿喀琉斯之踵?

微诊网 2018-9-2 12:00 AM 2836人围观 技术

记得在免疫室实习的一天,我刚开始是跟着老师做快速传染病四项(乙肝、丙肝、艾滋、梅毒),看着老师给我做了一遍,看似简单的操作,心里想着:这不就是免疫金标法吗?不就是滴几滴试剂然后看结果的事嘛?

接着来了一批标本,在签收过后,分好标本拿到老师面前,老师问我:“怎么样?会了吗?”我满怀自信地点了点头,接着她就在一边看着,我跟着她之前的操作做了一遍,但是,在做到HCV抗体的时候我停留了一下,本来要先加血清再加稀释液,我就突发奇想,我就反过来试试看,滴加完之后,我生怕它质控线会出不来,看着液体慢慢湿润到质控线,“咦,老师,反过来加结果一样做得出来”我高兴地说。

老师微微一笑“你再等多五分钟看看”。我就想:就算再等多十分钟不也一样吗。我对老师点了点头,五分钟过后,我过来看了看结果,咦!阳性的。老师走过来说:“你再把这个标本重做一遍,但是要先加血清,再加稀释液。”

这次我按照老师说的做,结果做出来居然是阴性!我吓了一跳,不过是把同样的东西顺序加反了,结果却天壤之别。

这时我的脸瞬间红了起来,老师对我说:“一步做错,就要苦了患者。你要记住,检验这个事就是不允许出现错误,要严格要求自己一定要按照规范的操作来进行,慢慢的你就会体验到!”

这是小编第一次接触到这个快速便捷的“小东西”,虽然操作简单,但是一个看似简单的操作顺序一旦搞错就会酿成参天大祸,那么“金标法”到底是一种什么样的方法呢?

(图片来源于网络)

金标法,又称免疫金标记技术。

氯金酸还原剂的作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称为胶体金。免疫金标技术类似于酶免疫技术,它是用胶体金标记单克隆抗体,作为某些激素如LH的定性或半定量测量。

金标法又分为:层析法和斑点渗透法。

层析法一般采用双抗原夹心法免疫测定原理,选择经纯化的基因工程制备的抗原,分别作为包被抗原和胶体金结合抗原。当待检标本中含有HIV抗体时,先和金标记抗原结合,由层析作用反应复合物沿硝酸纤维膜向前移动,当遇到包被抗原时,形成Ag-Ab-Ag-Au复合物富集在包被线上,形成红色沉淀线。在包被膜上还有一条质控线对照,故当有两条红线时判为阳性,只有一条红线时,判为阴性。

近年来发展的金标法检测HBsAg,与传统的酶免疫法(EIA)相比,具有简便、快速、准确,不需要仪器设备等优点,能满足临床急诊快速出结果的需要,且较适合使用于流行病学调查,应用前景非常宽广。

但是由于试剂和方法学的限制,某些时候,金标法所做出来的结果并不可靠,现在已经被许多大医院所淘汰,即使做,也是做一个初步筛查,不会再出诊断报告,需要酶免或者核酸定量检查才能作出准确的判断。


1:那么用金标法所做的术前四检还有意义吗?

(图片来源于网络)

小编认为术前四检是非常有必要的,因为这是必要的病原学检查,一是为了给医生保驾护航,二更是为了妥善地制定治疗方案来造福病患。

据统计资料表明,我国人群中乙肝的感染率达10%~12%,丙肝(HCV)感染率也很高。最近几年,包括梅毒、艾滋病在内的性病也进入一个快速增长期。

这些病毒性疾病的感染途径多种多样,如艾滋病除通过性传播外,还有母婴传播、血液传播。据北京市献血办的一位专家介绍,在这三种传播途径中,血液传播是感染HIV最直接的途径,如输入被病毒污染的血液,尤其是“窗口期”的血液(即献血者已被病毒感染,但还未出现抗体的阶段所献血液,不能被现有的检测手段查出);使用了被污染而又未经严格消毒的医疗器械,包括注射器、针灸针、口腔科器械、妇产科的接生用具以及外科手术用的刀子、剪子、钳子等。另外,在作胃镜、肠镜、膀胱镜等介入检查和治疗时,都有感染艾滋病病毒及其他病毒的可能性。


2:可是金标法虽然快速灵敏,但是结果的准确性有待商榷,临床大夫如果急着要结果,我们碰到了阳性结果是报还是不报?

如果真的碰到了这种情况,我们应该慎重,不能因为受到了临床的催促,就仓促地发结果,应当换另一家厂商的试剂复查,如果两种试剂所做出的结果不一样,那就更不能发,需要进一步做酶免法或分子生物学实验来确定,这种时候还应该通知临床大夫,如果不是很急的手术,最好可以将手术延期举行,等待准确的结果,如果是性命忧天的急诊手术,那就告知临床结果不能确定,让临床大夫按照阳性结果来做好预防措施,这个时候,我们就要当好为大夫保驾护航的明灯。

我们身为检验工作者,我们的工作平凡但是并不简单,在工作中会遇到很多问题,也会犯很多错误,面对金标法这种快速检查,确实,它非常的简单,但是它所造成的责任之重大是不可估量的,所以我们面对自己所做出来的结果应该更加谨慎,我们虽然面对的是标本,但是我们背负的是临床大夫的信任和患者的健康,所以把简单的事情做好,你就不简单了!希望可以和检验界各位同仁一起共勉。

作者:王澎

单位:洛阳市第一中医院检验科

来源: 临床检验医学
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