|
人类免疫缺陷病毒HIV感染导致艾滋病AIDS目前还没有疫苗可以预防，也没有治愈这种疾病的有效药物或方法。目前，艾滋病仍是威胁我国公众健康的重要公共卫生问题。
截止至2018年年底，中国存活艾滋病感染者约125万，其中近30%对自身患病不知情。2018年新发记录感染64170人，死亡18780人。联合国艾滋病规划署提出在2020年实现90%感染者通过检测知晓感染状况。由2018年的卫健委统计数据显示，我国还有30%，近40W感染者不知其感染状况，任务十分艰巨，市场也很巨大。今天小编带大家了解下HIV诊断技术、生产企业及产品。
近几年国外兴起的一种快速诊断技术，其原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带，当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样品(尿液或血清)后，由于毛细管作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动至固定有抗体的区域时，样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合，若用免疫胶体金或免疫酶染色可使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。目前市面上使用较多的快检平台主要是免疫层析法（LFA），即试纸条。试纸条是目前应用很广的快速检测平台。广泛应用于孕检、HIV等的快速诊断。其示意图如下所示：试纸条的制备非常简单，检测时间也很快，是目前HIV筛查最常用的方法。但该法容易出现假阳性或者漏检。目前最新的方法是采用荧光物质等进行信号标记，使用便携式的荧光阅读仪实现半定量或者定量检测。
将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离，然后通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印到固相支持物上。免疫印迹法是确认HIV感染的金标准，其具有很高的特异性。严格来说所有的HIV感染确认都应该做这个实验。原理如图所示：
又称为逆转录PCR，提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。简单来说，在RT-PCR中，一条RNA链被逆转录成为互补DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA复制。其有一步法和两步法之别，区别在于是否在同一个缓冲盐和酶体系中进行。其反应原理如图所示：
先说一下酶联免疫（ELISA），本质上酶联免疫和化学发光类似，最大的不同在于其属于异相免疫测试，在反应速度，效率，灵敏度等有所缺陷。时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）是以镧系元素标记抗原或抗体，并与时间分辨测定技术结合而建立起来的一种新型非放射性微量免疫分析技术，它根据镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。 |
