免疫组化（一），你不得不知道的名词解释

抗原：一种能刺激人或动物机体产生抗体或致敏淋巴细胞（免疫原性/抗原性），并能与这些产物在体内或体外发生特异性反应的物质（反应原性）。

抗原具备两个重要特性：免疫原性(immunogenicity)和免疫反应性(immunoreactivity)。免疫原性：即指抗原诱导机体发生特异性免疫应答，产生抗体和/或致敏淋巴细胞的能力。免疫反应性：是指能与相应的免疫效应物质(抗体或致敏淋巴细胞)在体内外发事特异性结合反应的能力。

抗体：机体在抗原物质刺激下，由B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的，可与相应抗原抗体发生特异性结合反应的免疫球蛋白。

第一抗体（一抗/探针）：和非抗体性抗原（特异性抗原）特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。

第一抗体就是平常所说的抗体，即能和抗原特异性结合。可以特异结合底物，就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。

第二抗体（二抗）：能和抗体结合，即抗体的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。

可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），作用是检测一抗。

一抗二抗都是一种可以特意截和别的物质的基团，而且一抗至少可结合2种其他基团（底物和二抗）。如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），则不需要二抗。但这样成本很高，因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记，再来检测一抗。而一抗识别底物。这样，当一抗结合到底物上，就可以通过二抗检测出来。

所以，发光位置，即目的蛋白。

特异性结合&非特异性结合：可以把特异性和非特异性理解成针对性和非针对性。

特异性结合就是只能跟某些特定的物质结合，非特异性结合则反之。

UP水：超纯水（Ultrapure water），是指电阻率达到18 MΩ*cm（25℃）的水。这种水中除了水分子外，几乎没有什么杂质，更没有细菌、病毒、含氯二噁英等有机物，当然也没有人体所需的矿物质微量元素，也就是几乎去除氧和氢以外所有原子的水。

RO水：即纯水，通过反渗透膜过滤后的水。

UP水比RO水更“纯”。所以up水跟ro水都很“干净”却不能喝，但又能用来做实验。

PBS：磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffer saline）一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用，蒸馏水不具有盐平衡作用，可以破坏生物蛋白的结构及生物特性；生理盐水不具有调整pH的作用，对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应，所以使用PBS是首选。

我们也常用其做“洗”的作用。

 TBS ：一种缓释剂（tris buffered saline），意思为三乙醇胺缓冲盐水溶液。或 triethanolamine buffered saline solution的简写，意思为 三羟甲基氨基甲烷缓冲盐水。

TBST：TBS+Tween的缩写,TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液用1N HC1调pH至7.4,Tween为一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力。

PBST：由PBS 加入了Tween 20, Tween 20 是非离子型去污剂。（可以结合western blot理解：因为western 中所用的膜可以与蛋白质结合，这样的话，孵育过程中，抗体是能够与膜非特异性结合的，为了防止以后曝光造成胶片背景太高，在孵育抗体后，混有Tween 2的PBS 能够将非特异性结合的抗体洗掉，增加特异性。在抗体的保存中，抗体往往是以极高浓度保存在甘油之中的，使用的时候按照一定的比例去稀释，TBST 跟TBS 都可以用来稀释抗体，以做孵育抗体之用。）

以上四种都是缓冲盐溶液，免疫组化里面可以根据实际需要选用某种进行“洗”的需要。现在很方便，有直接的液体购买，也有配好的颗粒盐购买。老师说以前他们都是自己配的呢！感恩现在的好环境吖~