冯仁丰教授谈B·R·A·H·M·S PCT产品检测病人样品检测结果的溯源性 ...

    很多厂商声明，他们的降钙素原产品与国际知名B·R·A·H·M·S的降钙素原，在检测病人样品上相关性良好，而且检测结果也具有溯源性。可惜，很多体外诊断产品厂商与临床实验室人员，对如何理解溯源性上概念很模糊。而且，不少临床实验室对降钙素原的基础内容也不甚清楚。今天金宝邀请到了我国检验界德高望重的老前辈冯仁丰教授，请冯老师为大家释疑解难吧。

    冯老师指出，至今国际上还没有公认的降钙素原参考物质或参考测量程序（方法），制备厂商只能自行建立“自用”的检测程序和一级校准品，为公司的产品校准品定值。BRAHMS公司对降钙素原的校准做法，正是ISO 17511导则规定了溯源链上端中的最后一个做法。最重要的是，B·R·A·H·M·S公司为了确保公司不同时代、不同系列的降钙素原的产品，对相同患者样品的检测结果一致，建立了自己的“金标准”参考物质和校准程序，由此形成了公司自己的经典溯源体系，很有特点。

1、B·R·A·H·M·S标准物质的发展
    B·R·A·H·M·S公司开始形成第一代降钙素原产品时，公司人工合成了第一个自己的降钙素原的参考物质PTN47。该物质由47个氨基酸组成。确定某一批的PTN47为准，成为公司的降钙素原的最高级校准品。并将另一批的PTN47作为公司产品校准品，以最高级校准品为准，通过病人标本比对，确定产品校准品与某批号检测产品组合下的校准值。与公司该批号产品一起销售给临床实验室。在使用PTN47为参考标准时，公司考虑到它仅是完整分子的一个多肽。

    所以，在配制标准液时，按照多肽与完整分子的比率多称了PTN47，期望给予纠正多肽不长的补偿。当时，将PTN-47形成的校准体系，称为“Urstandard PTN-47”，意即“金标准PTN-47”。但是，PTN47仅为47个氨基酸的多肽，在参与免疫检测反应中检测信号较微弱。为此，以后公司又合成了一个第二个降钙素原的115个氨基酸多肽，称为PCT 115参考物质。由于PCT 115参与免疫反应的能力增强，与PTN 47校准的检测产品间的结果有很大的差异。为了确保公司任何一代产品对相同病人样品检测降钙素原结果的一致，也与以往PTN47校准的产品对病人检测结果的一致，公司均以PTN 47校准的B·R·A·H·M·S PCT LIA为准。为了确保所有各代产品以后对病人样品检测结果的一致。首先必须完成由PTN-47与B·R·A·H·M·S PCT LIA产品的组合，和PCT115与B·R·A·H·M·S PCT LIA产品的组合间，在对病人样品检测结果一致下，校正PCT115的“标准”值。也即PCT115不可以自身在免疫检测中具有的实际检测值为准，它必须被调整到确保病人检测结果在这两组系统中的一致，以PTN-47与B·R·A·H·M·S PCT LIA产品的组合为准的值。

2、完成PTN47与PCT115交换
    实际检测显示的一组标准稀释液（即免疫检测中为形成校准曲线需要的系列标准），在PTN47与PCT115间，在相同的B·R·A·H·M·S PCT LIA产品下的结果比较呈曲线表现。因此，不可应用PTN47所有系列稀释液阅读点的直接校准。为确保临床检测结果的一致性，使用Urstandard-PTN47与B·R·A·H·M·S PCT LIA产品2h版本校准的，以标准样品S3（2 μg/L）为准。依据S3单点结果，计算出UrstandardPCT115范围其他标准的系列稀释液的临床显示浓度。以后，公司可以Urstandard-PCT115为准，与B·R·A·H·M·S PCT LIA产品2h版本组合，由PTN47 S3为准校正的PCT115，经系列PCT115稀释液去形成在PCT LIA下的校准曲线，对病人样品进行检测。

    这些病人样品再次在PTN47与B·R·A·H·M·S PCT LIA组合的比较下，证实与PCT115和B·R·A·H·M·S PCT LIA组合的结果比较，符合公司认可的一致性。这样，完成了PTN47与PCT115在B·R·A·H·M·S PCT LIA产品中得到了病人结果一致性的转换。使用Passing Bablok回归分析PTN47与PCT115在B·R·A·H·M·S PCT LIA产品结合的两个方法比较，确定偏移。该方法允许在X和Y变量下得到检测误差，它没有假设检测误差呈正态分布，Passing Bablok对于离群点处理非常稳健。使用Passing-Bablok分析显示了，对347例相关血清检测时，与LUMItest PCT 2h-版本在完整的检测范围内具有良好的相关（y = 1.01+0.05）。

    冯老师还介绍了如何确定标准浓度的控制范围，包括公司内部一级校准品的监视和检测标准浓度的校准。最后我们可以得出结论，B·R·A·H·M·S PCT LIA的校准历史覆盖了厂商的检测程序、厂商的校准品、厂商的一般检测程序和厂商的产品校准品。校准品依从了ISO 17511的要求。