有关结核菌素试验临床应用的最新专家共识（2016版）

一、概述

1.什么是结核菌素试验？

结核菌素试验是利用机体在感染结合菌后产生的迟发型变态反应（IV型过敏变态反应）来测知其是否受过结核菌感染，以帮助结核病的诊断、是否能够接种卡介苗（BCG）并判断接种效果。

2.结核菌素试验的原理是什么？

患者感染结核分枝杆菌4-8周后可获得免疫，产生致敏淋巴细胞，部分形成记忆免疫细胞，当皮肤再次接触到结核分枝杆菌抗原后产生许多细胞因子，使单核细胞/巨噬细胞聚集在真皮的血管周围，同时血管通透性增高，可出现硬肿、红斑、硬结反应。小儿受结核感染4～8周后，作结核菌素试验即可呈阳性反应。

3.结核菌素试验所用的OT和PPD有什么区别？

结核菌素皮肤试验最早是OT（即旧结核菌素，简称旧结素）试验。OT是人型结核菌培养8周后，加热杀死菌体，将滤掉死菌后的含菌体自溶及培养基成分的剩余部分浓缩至原量1/10的棕色透明液体。起初液体浓度不一，使用比较混乱，1952年WHO将其标准化成每毫升含1000mg相当于10万TU（结素单位）。OT除结核蛋白外，还存在很多非活性成分，特异性和敏感性较低，而且副反应相对较多，逐渐被纯度更高，特异性和敏感性更高，安全性更高的PPD所代替。

临床常用的PPD为卡介菌（结核菌素）纯蛋白衍生物，为无色澄明液体，是利用化学方法从结核菌培养液中提取出来的结核菌蛋白，含苯酚防腐剂，无不溶物或异物，因此较OT更为精纯，特异性反应强，诊断价值大。目前PPD已经全面取代OT用于结核菌素试验，目前的PPD规格多为每1ml含50IU卡介菌纯蛋白衍生物（BCG-PPD）。

二、PPD试验的具体操作

4.PPD试验的适应证是什么？

PPD试验是传统的结核病辅助细胞免疫诊断方法，在协助诊断结核感染上具有重要的临床意义。

依据《临床技术操作规范.儿科学分册：人民军医出版社（ekcg2014@126.com收录电子书）》建议的适应证为：①结核病的辅助诊断。②卡介苗接种3个月后，了解机体对卡介苗的细胞免疫反应。③判断过敏素质(atopy)患儿的预后。

5.PPD试验有无禁忌症？

依据卡介菌纯蛋白衍生物药物说明书以及《新编实用儿科药物手册（第2版）人民军医出版社（ekcg2014@126.com收录电子书）以及《临床诊断学.八年制第2版：人民卫生出版社（ekcg2014@126.com收录电子书）》：PPD试验婴儿及儿童均可使用，但患有发热（体温37.5℃以上、）急性传染病（如麻疹、百日咳、流感、肺炎等）恢复期、急性眼结合膜炎、急性中耳炎、广泛性皮肤病及过敏体质者、器质性心脏病、肝肾疾病、精神病、癫痫、细胞免疫功能缺陷、丙种球蛋白缺乏或年长女孩月经期时暂不宜使用PPD试验。

6.PPD试验如何做？

PPD试验方法目前有皮上、皮肤划痕或点刺与皮内注射法，以后者应用最为广泛，效果最为准确。

方法1：《卡介菌纯蛋白衍生物以及新编实用儿科药物手册（第2版）》：人民军医出版社（ekcg2014@126.com收录电子书）：吸取上述稀释液0.1ml（5U），采取孟都法注射于前臂掌侧皮内。

方法2：《临床技术操作规范.儿科学分册：人民军医出版社（ekcg2014@126.com收录电子书）》：于患儿前臂曲面皮内注射纯结核蛋白衍生物(PPD)0.1ml(含1U，0.0001mg)，48～72h后测量注射局部硬结直径。用圆珠笔尖顺皮肤表面从硬结一个远端向硬结方向滑动，当圆珠笔尖抵达硬结边缘，感觉到阻力时即停止滑动，皮肤上留下一条圆珠笔线痕。从硬结的另一远端（180°角）以同样的方式滑动圆珠笔，留下另一条线痕。测量两条线间的距离即为硬结的直径。以同样方法测量硬结的横径，计算横径和直径的平均值。

方法3：《儿科学（第8版）：人民卫生出版社（ekcg2014@126.com收录电子书）》：若患儿结核变态反应强烈，如患疱疹性结膜炎、结节性红斑或一过性多发性结核过敏性关节炎等，宜用1个结核菌素单位的PPD试验，以防局部的过度反应及可能的病灶反应。

方法4：.《诸福棠实用儿科学第8版.人民卫生出版社（ekcg2014@126.com收录电子书）》：目前主张直接注射5U PPD进行试验。

【小编：目前一般采用5U直接注射，但上述方法3所示情况应予注意】

7.对于近期（一般指2周内）已经做过结核菌素试验的患儿，再次行结核菌素试验时需要注意什么？

一是要注意部位选择需要避开第一次皮试部位以避免复强效应，一般选在其斜上方3-4cm处或取右前臂；二是注意详细询问上次皮试结果，必要时减少PPD用量；三是注射药物后需要密切观察局部变化，及时处理可能出现的问题。

8. PPD试验操作注意事项有哪些？

【依据网络资料整理而成，仅供参考】

①PPD试剂应放在摄氏2～8℃阴凉处避光储存，试剂稀释配制后应避免振荡，已抽吸好的试剂如＞30min最好弃之不用，已开的安瓿应在半小时内使用。如果安瓿有裂痕、制剂内有异物者不可使用。PPD试验所用的注射器及针头应当专用，不可作其他注射之用。

②注射前应详细询问患者情况，若已确定患有活动性结核者，不宜做此试验，以免诱发更严重的过敏反应或致病情加重。高热、各种传染病的恢复期，患有全身或局部皮肤病，本人或家族有过敏史者，其他预防接种不到2周者暂缓。

③刺入过深易影响结果观察，所以注射用针头越短、斜面越小越好，针头稍向下平行刺入皮内至不见针孔即可，注射部位选在前臂掌侧中下1/2～1/3交界，离手腕至少＞60mm，避开血管。如需近期重复试验，注射部位宜选另一端前臂，PPD具有复强作用，即在1年内重复试验，第2次可能会比第1次出现更强的变态反应。

④注射前应告知注射后可能出现的不良反应及注意事项。

⑤结果的判断在我国以硬结为标准，而红晕和硬结往往并存，因此应注意触诊，以免漏检红晕中的硬结。试验结果记录如为≥++，则需将测得的硬结的横径×纵径用毫米数表示记录下来，如有水泡、硬结、坏死和淋巴结炎等强阳性反应时应作详细记录。

⑥PPD结果记录单上除需要记录试验结果外，还需详细记录操作者、观察者和观察时间。

⑦必须注意不要与BCG（卡介苗）注射液混淆。