技术｜我们应该如何选择和使用移液器

移液器是诊断试剂开发和应用中必不可少的实验室工具，但由于有如此多的选择，知道该选择哪种移液器会造成混乱。各种类型的移液器之间有什么区别？购买新的移液器时应注意哪些属性？如何正确使用它，并确保它在未来几年内保持可靠？本文将涵盖所有这些问题。

移液器是使用最广泛的实验室工具之一。它们被设计用来测量少量的液体和/或在容器之间转移液体。它们有各种各样的类型，从简单的血清学和Pasteur移液器到含有主体、柱塞和活塞的更复杂仪器。后者通常被称为微量移液器，有多种类型，具有许多不同的功能。下面将介绍所有这些。

1.1、不同类型的移液器和它们的工作原理

1.1.1、空气式与容积式移液器

➤   空气式移液器：空气式移液器在活塞和样品之间有一个气垫。为了吸出液体，活塞首先下降，推出与所需液体体积相对应的空气体积，然后再向上移动，形成部分真空，由液体填充。

➤   容积式移液器：在容积式移液器中，活塞与样品直接接触，所以是一次性吸头的一部分，而不是移液器本身，以避免交叉污染。吸液过程与空气式移液器相似：活塞向上移动，产生部分真空，由液体填充。

图1 | 移液器如何工作：空气式移液器与容积式移液器

实验室通常使用空气式移液器，因为其价格较低，而且很适合大多数液体，包括粘性和挥发性液体，只要使用正确的技术和移液器吸头（见3.1节）。

但是，如果你经常需要移取非常粘稠或非常易挥发的液体，容积式移液器可能更适合你的需要。容积式吸头的成本较高，因为有集成活塞，但由于吸头内没有气垫，挥发性液体无法蒸发，粘稠的样品被更有效地推出来。

此外，容积式移液器在移取冷、热样品时更准确，因为它们不受温度变化的影响。

1.1.2、可调式移液器与固定体积移液器

顾名思义，可调节体积的移液器涵盖了一定的体积范围，而固定体积的移液器则只设计为移取特定的体积。在购买移液器时，实验室通常选择可调体积的移液器，因为它们具有更大的灵活性，可以用于许多不同的应用。

然而，它们的精确度在最大移液量时是最高的，并且随着移液量的增加而略有下降，因此固定体积移液器可能更适合某些应用。

因为可调容积空气式移液器通常是实验室的首选，所以下面的章节将重点介绍这种移液器类型。

2.4 人体工程学

在选择移液器时，应确保其重量轻、平衡性好，并能舒适地握在手中，适合左手和右手使用者。此外，吸头的加载和弹出力应尽可能低，以减少操作者的负担。

你应该做的第一件事是确保为你的实验选择合适的移液器。如上所述，可调节体积的空气式移液器在以最大容量进行移液时最为准确，因此你应始终选择能够处理所需体积的最小的移液器。

如果你的实验允许，你还应该确保在你开始工作之前，移液器、吸头和液体都已平衡到室温。这将防止移液器吸头内的气垫随温度变化而膨胀或收缩，这将对你的结果的准确性和精确性产生负面影响。

在移液过程中，还有一些其他事项需要注意：

➤   通过抽吸和分配3次标称体积来预湿移液器吸头，使气垫加湿。

➤   始终以不超过20度的角度握住移液器，以确保吸头内的静水压力保持一致。

➤   将吸头浸入液体时，不应低于表面2-3毫米，以尽量减少吸头外部的液体留存量。

➤   每次分配后，可能会有液滴粘附在吸头末端。为了清除它，你应该进行一次触摸关闭。

当你重复分装多个等分样品时，你应该丢弃系列中的第一个和最后一个分装，因为它们的相关体积误差最大。

3.1 正确的移液器吸头的影响

对结果的准确性和精确性有影响的不仅仅是使用正确的移液技术，还包括使用正确的吸头。例如，对于低表面张力或粘稠的溶液，低留量吸头产生的结果明显优于标准吸头。

3.2 如何移取粘性和挥发性液体

使用可调节体积的空气式移液器移取粘性和挥发性液体是一项挑战，但只要掌握正确的技术和移液器吸头就可以了。粘性液体应采用反向移液法缓慢吸出和分装。使用这种技术，吸出的液体比需要的量要大，这样可以补偿粘附在吸头内部的残留液体。对于粘稠的液体，低留量吸头是理想的选择，而对于粘度非常高的液体，或者容易产生泡沫的液体，建议使用宽口径的吸头。

移取挥发性液体时，一定要预湿吸头，吸液和分液时都要使用快速的移液速度，以减少蒸发的影响。在吸液和分液之间不要有不必要的停顿，使用反向移液来进一步减少蒸发对实际输送量的影响。

移液器通常在室温下用蒸馏水进行校准。当移取具有不同物理特性（比重和蒸汽压）的液体时，重新校准它们可能是有用的。