1、白细胞稀释液:2%冰乙酸(冰乙酸2ml,蒸馏水98ml,10g/L亚甲蓝溶液3滴),混匀过滤后备用。稀释液的作用为消除红细胞的干扰,可不加亚甲蓝。 2、标本:用EDTA-K2抗凝全血或者用微量吸管采集末梢血。 3、计数工具:改良牛鲍计数板、盖玻片及显微镜 1、稀释血液:在试管中加入0.38ml白细胞稀释液,用微量吸管准确吸取血样20μl,然后用棉花沿着吸管口方向擦净余血,同时检查血量是否足量。将吸管插入小试管中稀释液的底部,慢慢排出吸管内的血液,然后吸取上清液清洗吸管3次,立即混匀,制成白细胞悬液; 2、冲池:静置一段时间等红细胞完全破坏后,再次混匀。吸取10μl,沿盖玻片与计数板之间的缝隙冲入计数池。以计数池充满为准,如过多、过少或有气泡,则需要重新冲池; 3、计数:冲池后静置2-3分钟,待白细胞完全下沉后,用显微镜低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数,对压线的白细胞采用“记上不记下,数左不数右”的原则。 公式解读: N 4个大方格中白细胞的总数 ÷4 为每个大方格(即0.1μl)内白细胞平均数 ×10 1个大方格容积为0.1μl,换算为1.0μl ×20 血液稀释倍数 ×106 由1μl换算成1L 血常规中白细胞计数(WBC)及分类比例(DC)对于临床鉴别感染来说是最基本、最常用的指标,升高和降低的幅度也被检验医师和临床医师用作诊断疾病的手段。 血常规由于个体差异,影响指标的因素极多,且患者不同的疾病、甚至是不同的生理状态会引发血常规发生改变,其在感染方面诊断特异性差,容易出现误诊情况。 |