实验室检测和诊断HIV感染的标准（下）

二、HIV检测的质量控制

1 建立质量控制计划

质量控制计划是一套设计用来监控分析过程和检测有临床意义的误差的实验程序。在HIV诊断试验中，有很多与检测试剂盒或者试剂无关的因素可导致误差。误差在检测过程中的很多阶段都可出现，包括：标本采集、标本标记、标本分离/处理、转移、结果的读取/误解、错误转移至报告、报告的交流或解读等。这些误差很多可通过良好的实验规范来降低到最小。

（1）通过风险评估的方法学评价

评价使用一个新的HIV试验应包括新方法的风险评估，后者包括科学文献、试剂盒说明书的描述及通过负责完成此项试验的实验小组对实验过程的审核来考虑试验的优缺点。一个好的质量控制计划最先应考虑实验优缺点可能会如何影响实验结果的质量。正式的风险评估通常使用工具，如FMEA（失败模式与影响分析）。FMEA能识别检测过程中的每个步骤的风险并提出减少该风险的方法。FMEA表通过分析识别每一步骤中可能出现的失败点并对各个因素赋值，包括：

1）影响临床或实验室决定的严重程度；2）误差检出能力；3）出现的频率。这些因素得到的值相乘得出一个严重度比值。每个实验室应建立标准表明哪些严重度比值是可接受的风险，哪些需要减小。FMEA表还包括降低风险的措施及重新评估每个风险组的风险严重度。在此重评估中步骤中，质控品的使用有助于降低风险。

（2） 根据标准操作规程（sop）实施质量控制程序

风险评估后，应建立标准操作规程，评估试验的可靠性。质控计划应包括所有分析过程并描述这些过程如何提供可靠的实验结果。质控计划的sops用于日常操作和系统的周期性评价。质控计划的基本组成有：

质控品的类型。质控品的类型包括厂家提供和独立的质控品。另外，报告定量结果的试验需要不同水平的质控品，同时需要监测试验的线性范围。

分析质控品的频率。质控的频率必须以实验室对特定实验的风险评估为依据。影响风险的因素大体包括个人操作的变异、试剂换批号，设备的更新，储存或测试的环境温度的改变，整体测试的可靠性。

分析批的定义。分析批的定义取决于试验或者实验室处理标本的方式。一个分析批可能指自动分析仪上一次转移中的一个酶免疫分析板或者所有板。

质控品的位置。质控品的检测可在标本检测前，检测后，或者检测中的任何时候。根据可接受风险决定质控品的位置，sop应明确可靠质控位置与患者标本检测结果可靠性的关系。

检测可靠性的标准包括测定质控品性能范围的统计学分析，周期性数据审核的标准能检测趋势提示系统误差。质控的统计学评价包括建立平均值，标准差，变异系数，趋势，试剂盒和质控品改变后平均值的调整等已在其他文件上详细描述。

不可靠的检测、系统误差或漂移的解决方法。SOP应包括对质控不可靠的试验所得到的患者结果的处理的必要步骤作为质控计划的一部分。同样，根据数据的趋势检测到的系统误差的解决步骤也应纳入质控计划。

监控环境状况。

患者数据的趋势.查看患者人群的数据趋势以检测阳性率的突然变化，可揭示检测性能的问题。

根据仪器依赖的方法检测仪器的性能。

2 质控材料的类型

选择合适的质控品监测特定方法，监测应包括标本处理在内的整个试验过程。质控品应尽可能模拟患者标本，保证其监测试验过程的所有步骤。例如，含完整HIV病毒的血清质控品批准用于检测血清中HIV病毒或P24抗原的试验。合成衍生材料也可以作为质控品，但需进一步考虑他们是否能模拟检测靶标有意义的结构特性，后者可影响测定。例如，如果一个合成质控品来源于一个替代的病毒组装系统，在核酸提取中这个组装的靶标颗粒的表现是否同HIV病毒颗粒一样，或者目标序列的碱基组成和形成二级结构的能力是否相同，后者可能会影响核酸扩增试验的效力。

3 质控品的来源

（1）厂商提供的质控品

厂商提供的质控品是由试剂盒厂商提供并定值的。厂商提供的质控品有几种类型。试剂盒质控品作为检测试剂盒的一部分在每个分析批中同患者标本一样检测。内对照也是厂商提供的试剂盒的一部分，内对照和每个样本一起检测，监测每个标本的检测过程。例如PCR试验中，厂商提供的内对照与目标核酸无关，其作为试剂加入每个标本中，经历整个PCR过程，或者床旁设备中加入内对照试剂表明样本已加至设备中。另外，一些厂商也提供独立包装于试剂盒外的对照品。此类质控品的可接受标准由厂商决定。因此在试验中替换或者更改质控品需要进行可靠性验证，因为这些质控品是已建立的测试体系的重要组成部分。

（2） 独立质控品

独立质控品是非试剂盒厂商来源的，能从商业质控供应商购买或者由实验室自己制造（如剩余患者标本）。实验室自制的质控品在使用前必须充分验证其性能特征，证明其合格性。如果独立质控品由实验室自己制作，应有相应的SOP文件描述质控品的原材料，形成过程，检测其稳定性的过程和质控品的可接受标准。