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手术感染八项的检测方法及临床意义(下)

笔者苏洛 2018-11-5 11:12 AM 1885人围观 技术

(三)、艾滋病病毒抗体(抗-HIV)检测:


1、检测方法:迄今为止,血清学实验依然是HIV实验室诊断的主要依据。血清学实验即HIV抗体检测,是HIV感染诊断的常规方法,分为初筛试验和确诊试验两个步骤。


(1)、HIV抗体筛查试验:包括:酶联免疫吸附试验(ELISA)、明胶颗粒凝集试验(PA)、免疫层析/渗滤试验、快速检测试验(RT)等。


ELISA-抗-HIV检测,是国际上检测HIV抗体最早、使用最广泛的检测方法。从1985年第一代到目前第四代、第五代试剂盒,敏感性和特异性明显提高,HIV检测的窗口期不断缩短。虽然ELISA-抗-HIV检测有较高的敏感性和特异性,但也有少量假阴性和假阳性。假阴性主要在窗口期或发病后期抗体滴度下降时出现;假阳性主要是因为自身免疫病、肾病、肝病、接种疫苗等影响,但一般来说,假阳性的滴度通常不高。


(2)、HIV抗体确认试验:


HIV抗体确认试验包括:免疫印迹法(Western Blot, WB);免疫荧光法(IFA);条带免疫试验(LIF);放射免疫沉淀试验(RIPA)等。国内常用的确认试验是免疫印迹法(WB),具有高度特异性。HIV特异性抗体检测ELISA(高敏感性),加上WB(高特异性),诊断准确率大于99%,假阳性率约为0.00006%,造成错误诊断的机会几乎是零。


2、窗口期HIV感染的诊断:


抗-HIV阴性,不一定没有感染,可能处于病毒感染的窗口期,即从机体HIV病毒感染到产生抗体的这段时间,窗口期的实质是特异性病毒抗体从无到有、从少到多的转变过程,决定窗口期长短的因素有两个,一是机体对病毒感染产生抗体应答的程度,另一个是检测方法的敏感性。一般平均为2~3月(可以1~9月),但95%以上的HIV-1感染者产生抗体的时间是在6个月以内。诊断的方法有:


(1)、P24抗原检测:


机体感染HIV后,P24抗原是较早能从血清中检出的病原学标志,感染后约2~3周即可检出,1~2月左右进入抗原高峰,然后随着抗体的产生形成抗原抗体复合物,由于抗体的中和作用,P24抗原浓度下降至难以测出的水平。P24抗原检测其敏感性可达88.7%,特异性可达100%。


(2)、HIV RNA检测:


利用分子生物学PCR技术可以定性和定量检测艾滋病病毒核酸(HIV RNA),具有较高的敏感性和特异性,在HIV 感染早期检测诊断具有重要意义,对判断临床治疗效果、估计预后也是较好的指标,同时也是制定和调整治疗方案的主要依据。目前,临床常用的核酸检测方法:逆转录PCR(RT-PCR)和实时荧光定量PCR。


(四)梅毒血清特异性抗体(抗-TP)


1、梅毒感染血清学实验:


血清梅毒抗体检测是临床诊断梅毒感染的重要方法。梅毒螺旋体进入人体后4-6周,血清中可产生抗类脂抗原的非特异性抗体和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体。根据梅毒螺旋体进入人体后产生两种抗体的特征,将血清学试验分为两大类。


(1)非梅毒螺旋体抗原血清学试验:包括:①性病研究实验室试验(VDRL);②不加热血清反应素试验( USR);③快速血浆反应素环状卡片试验(RPR);④甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)。目前,最常用的具有代表性的方法为RPR、TRUST 。适用于梅毒筛查,疗效观察、复发或再感染的检查。

(2)梅毒螺旋体抗原血清学试验:包括:①梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA);②梅毒螺旋体血细胞凝集试验(TPHA);③荧光梅毒螺旋体抗体吸附试验(FTA-ABS);④梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA);⑤梅毒螺旋体蛋白印迹试验(TP-WB)等。


我院手术感染八项中梅毒血清特异性抗体(抗-TP)的检测方法即梅毒螺旋体抗原血清学试验中的梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)。


2、非梅毒螺旋体抗原血清学试验的临床意义:


(1)、阳性可能表示:①现症感染;②复发或再感染;③生物学假阳性;

(2)、临床用于梅毒筛查,抗梅毒治疗疗效观察。


3、梅毒螺旋体抗原血清学试验的临床意义:


(1)、阳性表示:①现症感染;②既往感染;


(2)、感染了梅毒,梅毒螺旋体抗体终生阳性,因此,不能作为评价治疗效果的指标。


(3)、可作为非梅毒螺旋体抗原血清学试验(如RPR等)初筛阳性标本的确证试验。


4、梅毒感染的血清学诊断:


非梅毒螺旋体抗原血清学试验(如RPR等)初筛阳性标本须要梅毒螺旋体抗原血清学试验的确证试验,以除外生物学假阳性;梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性结果,如需判断是否现症感染、还是既往感染或是复发、再感染、或抗梅毒疗效评价则需非梅毒螺旋体抗原血清学试验(如RPR等)帮助。

来源: 济南百博生物技术股份有限公司
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