各位检验人周末好,往期有小伙伴留言想要学习杂交瘤技术,本周「每周一图」栏目为大家安排: 将单个 B 细胞分离出来并加以增殖形成一个克隆群落,其可以产生出针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,称为单克隆抗体。B 细胞杂交瘤技术的原理就是利用聚乙二醇为细胞融合剂,使免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞融为一体,在 HAT 选择性培养基的作用下,只让融合成功的细胞生长。
用于融合的理想的骨髓瘤细胞具有以下特点:1. 细胞株稳定,易于传代;2. 自身不会产生抗体或细胞因子;3. 该细胞是 HGPRT 或 TK 的缺陷株。
细胞合成 DNA 的途径一般有两条:主要途径和补救途径(如图)。在 HAT 培养基筛选时,细胞的主要途径被氨基喋呤抑制,未融合的骨髓瘤细胞和自体融合的骨髓瘤细胞因主要途径被抑制,自身又缺乏补救途径的关键酶,导致这类细胞不能增殖而死亡;脾细胞虽然能够利用补救途径合成 DNA,但此类细胞属于分化终末期细胞,已失去增殖能力;只有脾细胞和骨髓瘤细胞融合生成的杂交瘤细胞,既可利用补救途径合成 DNA,又拥有无限增殖的能力得以在 HAT 培养基上生长而被筛选出来。 你还想学习哪块知识点呢?欢迎留言,下周日同一时间检验君为大家安排~ 帮助大家轻轻松松记考点! |