细节决定成败，谈谈容易被忽视的凝血时间手工法

前一阵子外出开会，有朋友聊到，严重脂浊，仪器无法测出凝血时间的标本该怎么办呢？我的建议是，一高速离心分离血浆和脂肪，用下层血浆检测；二用磁珠法仪器检测；三是手工法检测；最后就是择期重新采血了。

朋友说，他们是基层单位，第一第二个条件都无法满足，病人又是胰腺炎，恐怕重新采血也是脂浊，那么只剩下第三条了。说起来，手工法涉及一些细节，容易被忽视，而这些细节往往能决定试验成败。

PT：血浆100μl试管1，PT试剂200μl试管2，两支试管分别置于37℃水浴箱3分钟，在水浴箱旁，把PT试剂打入试管1，同时启动秒表计时，可将已加入试剂的试管1在水浴箱中轻轻摇晃混匀5秒左右，再取出，用倾斜试管的方法观察血浆的凝固，发现血浆开始凝固即停止计时。

APTT：血浆100μl+激活剂100μl混合于试管1，氯化钙100μl试管2，两支试管分别置于37℃水浴箱3分钟，在水浴箱旁，把氯化钙试剂打入试管1，同时启动秒表计时，可将已加入试剂的试管1在水浴箱中轻轻摇晃混匀20秒左右，再取出，用倾斜试管的方法观察血浆的凝固，发现血浆开始凝固即停止计时。

TT：血浆100μl试管1，TT试剂100μl试管2，其余操作同PT法。

FIB：一般不用手工法检测，因为需要用时间换算浓度，理论上当然也可以，但是步骤稍显繁琐。简要叙述：首先用定标血浆稀释3个梯度，再用FIB试剂测定3个稀释度的凝固时间，根据时间和3个稀释度对应的浓度，绘制标准曲线；最后检测样本的凝固时间，通过标准曲线找出对应的浓度。

一般来说，PT、APTT、TT正常，那么FIB基本问题不大，所以FIB不用手工测定也可以接受。

PS：试验细节

一是水浴的温度和时间控制要严格把握，样本和试剂都要先水浴；

二是倾斜试管前也应在水浴箱中水浴摇匀使反应充分；

三是倾斜试管观察凝固点时，要注意通过观察液体的流动状态的改变来及时准确判断。